《兽医微生物实验》教学课件：综合实习 病料中可疑病原菌的分离与鉴定.pptVIP

Page ? * 综合实习病料中可疑病原菌的分离与鉴定  实验原理 实验原理 实验原理 实验原理 葡萄球菌 革兰氏阳性球菌 培养特性：需氧或兼性厌氧 肉汤：呈均匀混浊，管底稍有沉淀。 普琼：形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的菌落。 直径1-2mm，菌落初呈白色，随后 因种不同发展成为金黄色、白色或 柠檬色。 生化反应： 多数能分解乳、葡、 麦、 蔗糖（+）， H2O2酶阳性，致病菌株 多能分解甘露醇，不产生靛基质 器材与材料 培养基准备 (一) 普通肉汤的制备(100ml) (二) 普通琼脂的制备 平皿(300ml) 斜面(200ml) (三) 蛋白胨水培养基的制备(100ml) 麦康凯培养基的制备（300ml） (四)葡萄糖蛋白胨水的制备(200ml) 三糖铁培养基的制备(300ml) 培养基的准备 1、计算称量 根据配方，计算 2、溶解 加热溶解时，要不断搅拌。如有琼脂在内，更应注意。待完全溶解后，补足水分到所需要的总体积。 3、调pH 1N NaOH或HCl（精密的pH试纸） 4、过滤 要趁热用四层纱布过滤。 5、 分装 不宜超过试管高度的1/3，装入三角烧瓶中的量以烧瓶总体积的一半为限。 /胶塞。 7、灭菌 容器外面再包一层牛皮纸或报纸。 8、无菌检验 37℃温箱培养24h，检查灭菌效果，无菌生长即可使用。 方法 方法 1.细菌的分离培养 采集鸡或鸭的肝脏接种麦康凯培养基和普通琼脂培养基， 37℃培养18-24h. 2.细菌形态观察 挑取在麦康凯培养基上的单个菌落，抹片，进行革兰氏染色镜检，并观察其菌落形态。 3.细菌的纯化 挑取单个菌落于普通培养基和麦康凯培养基划线，分离37℃18-24h. 4.挑取单个菌落革兰氏染色，镜检。 方法 5.生理生化鉴定 ①单糖发酵管接种 ②生理生化培养基接种： ?普通肉汤37℃ 24-48h→ 生长观察及Indole试验 ?蛋白胨水37℃ 24-48h →Indole 试验 ?葡萄糖蛋白胨水37℃ 24-48h → MR/VP ?三糖铁培养基37℃ 24-48h→观察底层/斜面是产酸,还是产碱，底层是否产气/H2S 结果记录 ? Page ? *