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硕士开题报告 山羊附睾特异性 Lipocalin蛋白的 表达特性和生物学功能研究  主要内容 研究意义与国内外研究进展 2研究内容及预期目标 3]拟解决关键问题一 4研究方法和技术路线一 「5创新特色与可行性论证 ∠6进度安排与经费预算一  、研究意义及国内外研究进展 研究意义 脂质运载蛋白( Lipocalin,LCN家族是指一些分 泌到细胞外的小分子蛋白质(长约160-180个氨基酸 残基)所组成的蛋白质超家族,广泛分布于细菌、植 物和动物( Flower等,2000)。其中附睾中分泌的 Lipocalin蛋白有许多参与了精子的成熟、运动及获能 过程,了解其结构功能及表达特性可为治疗雄性动物 繁殖障碍及提高动物繁殖率提供一定的依据  国内外研究进展 有8条反平行的β一折叠片围绕成的高 等,193度对称的β-桶装结构 有23个保守的 motif即结构保守区SCR 存在一对保守的二硫键 Lipocalin蛋白 家族特征 在 Lipocalin家族中,绝大部分的 lego Sanchez等 Lipocalin基因都具有典型的7外显子/ 06内含子的排列, 能结合疏水性小分子配体 Ivana等,19 能与可溶性高分子形成共价或非共价 等 结合的复合物; 与相应的膜受体结合。  国内外研究进展 本实验要研究的几种主要的附睾 Lipocalin (张永莲等,2001克隆得到多种附睾LCM LCN LC8、LCM9, LCM LoNIO 该基因定位于小鼠‖LCam6基因,它位于 染色体2A3B,大鼠染大鼠染色体3p13上的 色体313上该基因在1 lipocalin基因富集区 小鼠附睾中头部到远与Lcn5与Lcn8成簇 都位于小鼠染色体 头部表达 marere等排列。大鼠Lcn6基 2A3-B ( Xiuping Yu 1998)能够结合全反 因含有7个外显子和 等,206)。LC8 式和9-顺式视黄 6个内含子,其外显在替代信号转导□ 参与视黄酸转运及附子编码181个氨基酸 过程中发挥作用( 睾抗炎症反应其中N端20个氨基 Ga等,2009) 酸残基为信号肽 1993) ( Katherine等,2003) 附睾特异性 Lipocalin受雄 激素调控( Suzuki等,2004  国内外研究进展 在染色体上的定位 Human Chromosome 9 diVoT Mb13521 135.00 133,87 126.29 -Suzuki a P OBP2A LCN1 (摘自 Katherine等,2003) Mouse chromosome 2 Ln3L作Lea9 x11 图3.1 Lipocalin基因在小鼠2号染色体上的定位 (摘自 Suzuki等,2004)  国内外研究进展 附睾中 Lipocalin 蛋白家族功能 转运维生素A 信息素输运 Lipocalin蛋白家族功能 免疫应答)L0等,202:林东海等其他 2012) 细胞生长与 精子的成熟 代谢调控 及储存  二、研究内容及预期目标 山羊不同组织、不同发育阶段五种基因 的表达特性 山羊附睾中的五种LC基因表达的区域特异 性 研究内蜜 生物功自 五种C蛋白与精子的结合力  预期目标 获得山羊五种LCW获得LC基因在山 基因的CD区序列,羊不同发育阶段通过功能分析 及序列的生物信和不同组织的表研究CN在附睾 息学分析结果。达特性。 中的作用机制。  、拟解决的关键问题 有效 SIRNA的筛选 及动物模型的建 立是LCN功能研究 的关键 附睾特异性 LCN基因在山羊 不同组织、不同 周期的表达特性