实验五 薄层色谱实验.ppt

实验五薄层色谱实验  实验目的 ·1、掌握薄层色谱的操作技术。 ·2、了解薄层色谱的基本原理和应用  实验原理 1、原理 薄层色谱( Thin Layer chromatography)常用 TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色 样品在薄层板上的吸附剂(固定相)和 溶剂(移动相)之间进行分离。由于各种化 合物的吸附能力各不相同,在展开剂上移时 ,它们进行不同程度的解吸,从而达到分离 的目的。  2、薄层色谱的用途 1)化合物的定性检验。(通过与已知标准物对比 的方法进行未知物的鉴定)在条件完全一致的情 况,纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距 离,称比移值(Rf值),所以利用薄层色谱法可以 鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是 否为同一物质。  影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂 颗粒的大小,酸碱性,活性等级,外界温度和展开 剂纯度、组成、挥发性等。所以,要获得重现的比 移值就比较困难。为此,在测定某一试样时,最 用已知样、品进行对照。 溶质最高浓度中心至原点中心的距离 R 溶剂前沿至原点中心的距离  2、快速分离少量物质(几到几十微 克,甚至0.01μg 3、跟踪反应进程在进行化学反应 时,常利用薄层色谱观察原料斑点 的逐步消失,来判断反应是否完成 4、化合物纯度的检验(只出现一个斑 点,且无拖尾现象,为纯物质)  三、实验装置 薄层板 玻璃板 SiO 上涂吸附剂层Al2O3 上行法 下行法 滤纸条 层析缸 展开剂 层 薄层树析 层板 展开剂  1.薄层板的制法; 2.薄层色谱活化; 3.薄层色谱点样; 4.薄层色谱展开; 5.薄层色谱显色与分析;  四、实验步骤: 1、吸附剂的选择 薄层色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶。 1)硅胶 “硅胶H”一不含粘合剂 “硅胶G”一含煅石膏粘合剂; 其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大,展开剂 移动速度快,分离效果不好;反之,颗粒太小溶 剂移动太慢,斑点不集中,效果也不理想。  四、实验步骤: 对化合物的吸附能力与它们的极性成正比, 具有较大极性的化合物吸附较强,因而Rf值较 酸和碱醇、胺、硫醇〉酯、醛、酮 芳香族化合物卤代物、醚烯饱和烃 本实验选择的吸附剂为薄层色谱用硅胶G。