2017人教版高中生物选修一5.1《DNA的粗提取与鉴定》word教案.docx

专题 5 DNA 与蛋白质技术 课题 5.1 DNA 的粗提取与鉴定 一、【 课题目标】 （一）知识与技能 1、通过尝试对植物或动物组织中的 DNA进行粗提取，了解 DNA的物理化学性质。 2、理解 DNA粗提取与鉴定的原理 （二）过程与方法 掌握 DNA如提取计数，能利用 DNA的性质进行实验设计和操作 （三）情感、态度与价值观 通过对 DNA的粗提取的实验过程的设计及操作， 锻炼科学的思维方法， 培养实事求是的科学态度。 二、【课题重点】 DNA的粗提取和鉴定方法 三、【课题难点】 DNA的粗提取和鉴定方法 四、【教学方法】 启发式教学 五、【教学工具】 多媒体课件 六、【教学过程】 （一）引入新课 无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂， 都是从细胞中提取出来的。 从今天开始，我们学习生物化学成分的提取与改造技术。 b5E2RGbCAP （二）进行新课 1．基础知识 1．1DNA粗提取的原理 提取 DNA的原理包括 DNA的溶解性和耐受性两个方面。问：提取 DNA的溶解性原理包括哪些方面？ DNA在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同； DNA不溶于酒精。 1．1．1 分析图 5－1。DNA在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使 DNA析出，又需要使用什么浓度？ p1EanqFDPw 1 / 10 在 0.14mol/L 时溶解度最小；较高浓度可使 DNA溶解； 0.14mol/L 可使 DNA 析出。 1．1．2 在溶解细胞中的 DNA时，人们通常选用 2mol/LNaCl 溶液；将 DNA 分子析出的方法是向溶有 DNA的 NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释 NaCl 溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但 DNA却不能溶于酒精（特别是 95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。 问：采用 DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？ DXDiTa9E3d 将 DNA和蛋白质进一步分离。 1．1．3 提取 DNA还可以利用 DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？ RTCrpUDGiT 蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对 DNA产生影响。温度值为 60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀， 而 DNA不会变性。5PCzVD7HxA 补充： DNA的变性是指 DNA分子在高温下解螺旋，其温度在 80℃以上，如在PCR技术中 DNA变性温度在 95℃。 jLBHrnAILg 思考：观察图 5-2 ，洗涤剂在提取 DNA中有何作用？ 洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。 1．2DNA的鉴定原理 当鉴定提取出的物质是否是 DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定？ 在沸水浴条件下， DNA遇二苯胺呈现蓝色。 原理总结。通过利用不同浓度 NaCl 溶液溶解或析出 DNA，可以从细胞中提取和提纯 DNA；再利用酒精进一步将 DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是 DNA。xHAQX74J0X 2．实验设计 2．1 实验材料 2.1.1 不同生物的组织中 DNA含量不同。在选取材料时， 应本着 DNA含量高、 材料易得、便于提取的原则。你认为教材提供的材料中哪些不适合提取 DNA？ LDAYtRyKfE 哺乳动物的血液和液体培养基中的大肠杆菌。 2.1.2 从核 DNA数目来看，猪 38 条，鸡 78 条，哺乳动物血 0 条，猕猴桃 58 条，洋葱 16 条，豌豆 14 条，菠菜 12 条，大肠杆菌 1 条。请选择动植物材料各一种。 Zzz6ZB2Ltk 鸡血、猕猴桃。 2．2 破碎细胞，获取含 DNA的滤液 若选用鸡血和洋葱作实验材料，则怎样获取含 DNA的滤液？ 在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液；切碎洋 葱，加入一定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。 dvzfvkwMI1 在以上实验中，加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么？过滤时应当选用（滤纸、尼龙布）。 血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂； 洗涤剂瓦解细胞膜； 食盐溶解 DNA物质；选用尼龙布进行过滤。 2 / 10 在 理植物 需要 行研磨，其目的是什么？研磨不充分 生什么 果？ 破碎 胞壁，使核物 容易溶解在 NaCl 溶液中；研磨不充分会使 DNA的提取量减少。 具体做法。 10mL 血＋ 20mL蒸 水→同方向 拌→ 3 尼 布 → 液 2．3 去除 液中的 最初 得的 DNA 液含有蛋白 、脂 等 ，需要 一步提 DNA。 教材提供的三种方法，分析其中的原理。 rqyn14ZNXI 方案一的原理是 DNA在不同 度 NaCl 溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白