交叉配血实验笔记.pdf

实验八 交叉配血试验 交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细 胞混合，观察有无凝集现象（见图 4-3-1-1 ）。输血时，一般主要考 虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集； 其次才考虑受血者的 红细胞不被供血者的血清所凝集。 前者叫交叉配血试验的主侧 （也叫 直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和 次侧均无凝集，称为 “配血相合 ”，才能进行输血；如果主侧凝集，称 为 “配血不合 ”或 配血禁忌“ ”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次 侧凝集，可以认为 基本相合“ ”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多， 密切注视有无输血反应。 【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。 【实验对象】 人体（学生自愿者）。 【实验器材和药品】 1．仪器 显微镜， 离心机。 2 ．器械 采血针， 消毒注射器， 双凹玻片， 小试管，竹签，棉球，腊笔。 3．药品 标准 A 血清，标准 B 血清， 生理盐水， 75％酒精，碘酒。 【实验步骤和观察指标】 图 4-3-1-1 交叉配血示意图 （一）红细胞悬浮液的配制 按需要型别，取全血 1ml ，加等渗盐水 2 ～3ml ，充分 摇匀离心沉淀， 弃去上清液，然后再加生理盐水 2 ～3ml 按上述方法洗涤，共三次， 取压积红细胞 5 滴，加新鲜等渗盐水 4 ml ，即成 5 ％红细胞悬液。 （二）交叉配血 基本原理见图 4-3-1-1 示 。 盐水介质交叉配血试验 实验原理 天然 IGM 类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中 发生凝集现象。可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方 RBC 的 IgM 抗体（ ABO 血型中抗 A 抗 B 抗体以 IgM 抗体为主）。 实验步骤 取二试管，分别注明 “主 ”、 “次 ”字样，主侧滴入供血者红细胞悬 液一滴和受血者血清一滴； 次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者 血清一滴。混匀后 1000rpm 离心 1min，取出观察结果。如两侧均无 凝集现象， 可多量输血； 如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输 血；如主侧凝集则不能输血。 低离子聚凝胺介质交叉配血试验 实验原理 红细胞表面带有大量的负电荷， 以避免其产生自发性聚集， 当红细 胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成 Zeta 电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用 低离子溶液（ LIM) ，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子 云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。 其后，加入凝聚 胺溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很 多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞 Zeta 电位 降低，缩短红细胞之间的距离， 使红细胞产生非特异性的凝聚。 最后， 加入悬浮液 , 悬浮液具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞 非特异性凝聚散开， 试验结果为阴性； 但如果红细胞被相应的抗体致 敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。 实验步骤 1 取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）