动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课.pptVIP

QQQQ * 预习案点评 融合方法：物理法：离心、振动、电激 化学法：PEG 植物细胞融合成功的标志：杂种细胞再生细胞壁 植物体细胞杂交技术成功的标志：杂种细胞培育成新的植物体 体液免疫中特异性识别抗原的细胞是：T细胞 B细胞 记忆B细胞 吞噬细胞 T细胞 记忆B细胞 浆细胞 预习案点评 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 提出问题 疑难分析 认真度 整齐度 组长 组别 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 实例1： 自然融合 实例2： 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验 人为诱导融合 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 主讲人： 付 强 【学习目标】 1.能够列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。 2. 能叙述单克隆抗体制备过程； 明确各步骤目的； 能举例说出其应用及意义。 一.动物细胞融合 1.原理 2.方法 3.意义 4.用途（特别） 核心知识点： 突破_________________，使__________成为可能。获得杂交细胞，用于_______ 克服 不亲和的障碍，获得杂种_________ 意义和用途 杂交细胞具有 杂种植株含有两种生物的遗传物质 杂种植株（或杂交细胞）特点 除应用植物体细胞杂交手段外，还有 诱导融合的方法 用____________使细胞分散后诱导细胞融合 用_____________、__________去除细胞壁后诱导原生质体融合 融合前处理 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 项目 【归纳提升】 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶 果胶酶 胰蛋白酶 离心，振动，电激，PEG 灭活病毒 两个或多个细胞的遗传物质 远缘杂交 远缘杂交 有性杂交局限 单克隆抗体制备 植株 二、单克隆抗体制备的过程 问题导引：1.抗体从何而来？ 2.传统抗体制备的方法是什么？弊端有哪些？ 3.能否通过单独体外培养浆细胞的方式大量 获得相应抗体? 4.用什么方法能让浆细胞在体外培养时既能 产生抗体又能无限增殖? 5.“单” “克隆” 各指什么含义？ 课本P53资料，找出单克隆抗体的概念： 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 单: 单一浆细胞 克隆: 无性繁殖 （细胞增殖） 单克隆抗体:单个浆细胞克隆形成的细胞群产生的化学性质单一特异性强的抗体。 二. 单克隆抗体制备的过程 【小组活动】 小组合作--尝试设计“单克隆抗体的制备”流程 目的：自查预习情况 要求：1.根据预习情况，梳理思路，利用手中材料尝 试对“单抗”制备流程进行设计； 2.组内交流设计思路； 3.小组代表黑板展示设计流程，并作简要说明。 把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 骨髓瘤细胞 单克隆抗体 B淋巴细胞 （浆细胞） 杂交细胞 2.融合过程中会出现几种类型的细胞？若只考虑两两融合呢？ 5.淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗？若不是，下一步如何操作？ 3.该过程得到的细胞哪种是我们所需要的？其特点是？ 4.如何淘汰掉我们不需要的细胞？ 6.如何获得大量的单克隆抗体？ 1.如何获得特定的浆细胞？ 骨髓瘤细胞 单克隆抗体 B淋巴细胞 （浆细胞） 杂交细胞 2.融合过程中会出现几种类型的细胞？若只考虑两两融合呢？ 5.淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗？若不是，下一步如何操作？