诊断学 溶血贫血.ppt

（五）自身免疫性 溶血性贫血检测 autoimmune hemolytic anemia AIHA 自身免疫性溶贫（ AIHA ）：是 体内免疫发生异常，产生自身抗体 或（和）补体。结合在 RBC 膜上 ， RBC 易被单核－巨噬细胞系统 所吞噬， RBC 破坏加速而引起一 组溶血性贫血。 （ 1 ）抗人球蛋白试验 ( Coombs) 原理 直接抗人球蛋白试验： 自身免疫性溶 血性贫血（ AIHA ）血清中有抗自身红细胞的不完 全抗体，他与表面附有相应抗原的红细胞结合， 成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与红细胞表面 不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝 集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。 —— 抗人球蛋白直接试验阳性； 间接抗人球蛋白试验 ：检查血清中有无游 离的不完全抗体，敏感性差。 抗人球蛋白 IgG 不完 全抗体 RBC 膜脂质丢失 = 变形能力下降 = 脾清除率增加 Normal Hereditary spherocytosis 细胞膜 细胞骨架 红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 RBC 孵育渗透性试验 自身溶血试验及纠正试验 (1)RBC 渗透脆性试验 检测红细胞对不同浓度低 渗盐溶液的抵抗力 等体积的血液加入一系列的低 渗 NaCl 溶液中 ; 达到平衡 ; 高速离心并测定光密度 . 大多数正常 RBC 在 NaCl 浓度 约 0.50% 时开始结构破坏 . 当盐浓度进一步降低 渗漏和 溶血增加 . 正常渗透脆性 HS 时低渗溶液中的 异常溶血 ? 参考值 ? 开始溶血： 0.42%~0.46% （ 4.2~4.6g/L ） NaCI 完全溶血： 0.28%~0.34% （ 2.8~3.4g/L ） NaCI ? 临床意义 ? 开始溶血＞ 0.50 ％、完全溶血＞ 0.38 ％ 为脆性增高 （ 1 ）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 （ 2 ）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫 血、缺铁性贫血 (2) 红细胞孵育渗透脆性试验 原理 37 ℃ 孵育 24 小时，细胞内葡萄糖消耗增 加， ATP 减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增 高 。 参考值 未孵育 50% 溶血 4~4.45% 孵育 50% 溶血 4.65~5.9% 意义 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 (3) 自身溶血试验及其纠正试验 ? 红细胞在 37 ℃孵育 48 小时，其间由于膜异常引 起钠内流倾向明显增加， ATP 消耗过多；或糖酵 解途径酶缺乏所引起 ATP 生成不足等原因可导致 溶血，称为自身溶血试验。 ?在孵育时，加入葡萄糖或 ATP 作为纠正 物，观察溶血可否有一定的纠正，称为 纠正试验。 ? 正常人轻微溶血，溶血度 3.5% ； 加葡 萄糖、 ATP 溶血明显纠正， 溶血度 1% 。 ?遗传性球形红细胞增多症和先天性非球 形细胞性溶血性贫血的鉴别诊断。 临床意义： 1 、 遗传性球形红细胞增多症时，溶血明显增 加，加葡萄糖、 ATP 溶血明显纠正。 2 、Ⅰ型先天性非球形细胞性 HA G6PD 缺陷 ： ＋ ATP ：可纠正 但不能纠至正常 ＋ G ： 同上 3 、Ⅱ型先天性非球形细胞性 HA PK 缺陷 ： ＋ ATP ：可纠正 ＋ G ： 不纠正 （三）红细胞酶缺陷的检测 红细胞失去核和线位体，不含糖原，必 须从血中吸取葡萄糖以获得能量，红细胞内 缺乏完整的有氧氧化酶系统，不能进行有氧 氧化。 无氧糖酵解（ 90 ％） — 丙酮酸激酶 戊糖旁路途径（ 5 ％ -10 ％） — 葡萄糖 6- 磷酸 脱氢酶 G6PD 和 PK 缺陷 ? ATP 合成减少时，红细胞膜上 Na+-K + -ATP 酶活性减低，红细胞内钾丧失而 钠增加，易在单核 - 巨噬细胞系统内阻 留和破坏。 ? ATP 合成减少，影响膜上钙 - 活性 ATP 酶，使钙沉积在细胞膜上，改变膜的 柔韧性和变形性，在血循环易于破坏。 （ 1 ） 自身溶血试验及其纠正试验 结果：均阳性，即溶血率 5% ，多者可 50% ? G6PD 缺陷 ： ＋ ATP ：可纠正 但不能纠至正常 ＋ G ： 同上 ? PK 缺陷 ： ＋ ATP ：可纠正 ＋ G ： 不纠正 （ 2 ） 高铁血红蛋白还原试验 G6P 6-PGA 核酸 -5- 磷酸 G-6-PD G-6-PD NADP + NADPH NADP + NADPH ? NADPH 是高铁血红蛋白还原酶和谷胱甘 肽还原酶的辅酶。 G6PD 缺陷 ? NADPH 减少时，高铁血红蛋白和谷胱甘 肽还原下降。 参考值： 高铁血红蛋白 还原率 75% 高铁血红蛋白 0.3-1.3g/