现代酶工程-10有机溶剂中的酶催化作用.pdf

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第十章 有机溶剂中的酶催化作用 长期的观点认为: 有机溶剂是酶的变性剂、失 活剂这一传统酶学思想的影响 下,酶在有机介质中催化作用的 研究此前几乎毫无进展。 这一观点直到1984年,非水 溶剂中酶催化的研究才取得了突 破性的进展。 1984年美国Klibanov, A.M.在 Science上发表了一篇关于酶在有 机介质中催化条件和特点的综 述。 Klibanov等的工作 ——在仅含微量水的有机介质 (Microaqueous media)中成功地酶 促合成了酯、肽、手性醇等许多 有机化合物。 基于研究工作,Klibanov等提出 只要条件合适,酶可以在非生物体系 的疏水介质中催化天然或非天然的疏 水性底物和产物的转化,酶不仅可以 在水与有机溶剂互溶体系,也可以在 水与有机溶剂组成的双液相体系,甚 至在仅含微量水或几乎无水的有机溶 剂中表现出催化活性。 这一观点无疑是对酶只能在 水溶液中起作用传统酶学思想的 挑战 酶在非水介质中的催化反应具有在许多常规水溶液中所没有的 新特征和优势: ①可进行水不溶或水溶性差化合物的催化转化,大大拓展了酶催化 作用的底物和生成产物的范围; ②改变了催化反应的平衡点,使在水溶液中不能或很难发生的反应 向期望的方向得以顺利进行,如在水溶液中催化水解反应的酶在 非水介质中可有效催化合成反应的进行; ③使酶对包括区域专一性和对映体专一性在内的底物专一性大为提 高,使对酶催化作用的选择性的有目的的调控的实现成为可能; ④大大提高了一些酶的热稳定性; ⑤由于酶不溶于大多数的有机溶剂,使催化后酶易于回收和重复利 用; ⑥可有效减少或防止由水引起的副反应的产生; ⑦可避免杂水溶液中进行长期反应时微生物引起的污染; ⑧可方便地利用对水分敏感的底物进行相关的反应; ⑨当使用挥发性溶剂作为介质时,可使反应后的分离过程能耗降低 从上世纪八十年代中期开 始,酶在非水介质中催化反应的 研究十分活跃。 现已报导,酯酶、脂肪酶、蛋白 酶、纤维素酶、淀粉酶等水解酶类; 过氧化物酶、过氧化氢酶、醇脱氢 酶、胆固醇氧化酶、多酚氧化酶、多 细胞色素氧化酶等氧化还原酶类和醛 缩酶等转移酶类中的十几种酶在适宜 的有机溶剂中具有与水溶液中可比的 催化活性。 用于酶催化的非水介质包括: (1) 含微量水的有机溶剂; (2) 与水混溶的有机溶剂和水形成的均一体 系; (3) 水与有机溶剂形成的两相或多相体系; (4) 胶束与反胶束体系; (5) 超临界流体; (6) 气相。 非水酶学的研究主要集中在三个方面: 一、非水酶学基本理论的研究,它包括影 响非水介质中酶催化的主要因素以及 非水介质中酶学性质。 二、通过对酶在非水介质中结构与功能的 研究,阐明非水介质中酶的催化机制 ,建立和完善非水酶学的基本理论; 三、利用上述理论来指导非水介质中酶催 化反应的应用。 一 非水介质反应体系 通常,酶催化反应体系包括了水溶液反应 体系、有机介质反应体系、气相介质反应体 系、超临界流体介质反应体系等多种,在这些 反应体系中,除水溶液反应体系外,其他的反 应体系统称为非水介质反应体系。在众多非水 介质反应体系中,以有机介质反应体系的研究 最多,应用也最广泛。 常见的有机介质反应体系主要包括了微水 有机介质体系、与水溶性有机溶剂组成的均一 体系、与水不不溶性有机溶剂组成的两相或多 相体系、胶束体系和反胶束体系等。 1 微水有机介质体系 微水有机介质体系是由有机 溶剂和微量的水组成的反应体 系,也是有机介质酶催化中应用 最为广泛的一种反应体系。 酶分子的结合水对维持酶分子的空间 构象和催化活性至关重要。一般酶都是以 冻干粉或固定化酶的形式悬浮于有机介质 之中,在悬浮状态下进行催化反应。 2 与水溶性有机溶剂组成的均一体系 由水和极性较大的有机溶剂互相混溶 组成的反应体系,体系中水和有机溶剂的

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