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2013-2014 年度第二学期基因工程期末考试
卷型: A 考试时间: 90 分钟 满分: 100 分
一、名词解释( 3×5)
限制性内切酶 ( 或其它工具酶 ) :能在特异位点上催化双联 DNA分子断裂,产生相应的限制性 DNA片段
荧光定量 PCR: 所谓实时荧光定量 PCR技术,是指在 PCR反应体系中加入荧光基团,利用
荧光信号积累实时监测整个 PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法
(半定量 PCR: 是近年来常用的一种简捷、特异的定量 RNA测定方法, 通过 mRNA反转录成
cDNA,再进行 PCR扩增,并测定 PCR产物的数量,可以推测样品中特异 mRNA的相对数量)
星活性:非标准条件下切割相似序列,产生非特异性片段
同裂酶(或同尾酶):来源不同但具有相同识别序列,产生相同或不同末端
转基因技术 (或转基因动植物等):就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改造生物的目的。二、填空( 1×15)
1.Cosmid 实际上是由 cos 位点和质粒构成的杂合载体, 也可以说是带有 cos 序列的质粒。
超螺旋质粒 DNA、开环质粒 DNA、线状质粒 DNA 在琼脂糖凝胶电泳的特点是:
电泳的泳动速度由大到小分别是:超螺旋质粒 线状质粒 开环质粒 。
质粒 DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。
基因工程中常用载体是质粒、 噬菌体、 动植物病毒。
设计引物是一般要求 C+G的比例在 40%-60%,长度在 17-30bp 。
6.BAC 载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性 。
三、选择题( 2× 15,实卷应是 1×35)
基因工程创始人( D)
A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen
2. 迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于(
A. 既可以作用于双链 DNA ,又可以作用于单链
B. 只能作用于单链 DNA
C)
DNA
只能作用于双链 DNA
只能作用于 RNA
氨苄青霉素的工作原理为( A )
A. 可以抑制细胞壁肽聚糖的合成 B. 可以抑制核糖体的转位 C. 可以与核糖体 50S 亚基结合并抑制蛋白质合成
D. 可以与核糖体 30S 亚基结合并抑制蛋白质合成
反转录酶是一种( C)
A. 依赖
C. 依赖
DNA的RNA的
DNA聚合酶DNA聚合酶
B.
D.
依赖
依赖
DNA的 RNA聚合酶
RNA的 RNA聚合酶
5.II 类限制性内切核酸酶 ( A )
A.仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供
B.限制性识别非甲基化的核苷酸序列
C.有外切核酸酶和甲基化酶活性
D.仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供
下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是II 类酶的识别序列 (C)
A.GAATCG B.AACCTT C.GATATC D.ACGGCA
7、(多选)在基因工程中,可用碱性磷酸酶 ( AB ) 。A.止 DNA 的自身环化B.同多核苷酸激酶一起进行 DNA 的 5’端标记C.制备突出的 3’端
D.上述说法都正确
8.K1enow 酶与 DNA 聚合酶相比,前者丧失了 ( C ) 的活性。
A.5’→ 3’ 合成酶 B .3’→ 5’ 外切酶
C.5’→ 3’ 外切酶 D .转移酶
自然界中存在的植物植物基因工程载体是( D)
A.YAC B. 根癌农杆菌 C. Puc18 D.Ti 质粒
10.质粒具备下列特征,因此适合作为克隆载体,除了 (B) 。
A.赋予宿主细胞某种可检测的特性
B.甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解
C.独立复制的能力
D.可复制自身 DNA 以及插入的外源 DNA
11.用碱法分离质粒 DNA时,染色体 DNA之所以可以被除去,是因为 (C) 。
A.染色体 DNA断成了碎片
B.染色体 DNA分子质量大,而不能释放
C.染色体变性后来不及复性
D.染色体未同蛋白质分开而沉淀
12.DNA提取过程中,异戊醇的作用是 (D) 。
A.使蛋白质脱水 B .使 DNA脱水
C.帮助 DNA进入水相 D.减少气泡,促进分相
13.PCR反应的必备条件是 (B) 。
A. 至少有 100 个起始 DNA分子 B .拟扩增的目的 DNA片段的部分序列信息 C. 扩增需要 cDNA模板 D. 至少 100kb 长度的模板
你打算扩增下面所示的两段序列之间的 DNA,
5’-GACCTGTGGAAGC----------------------CATACGGGATTG-3 ’ 3 ’
-CTGGACACCTTCG-----------------
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