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真菌真菌镜检染色 乳酸棉兰酚染色 天津市第三中心医院 检验科张健东 真菌标本的接种 2.培养基选择 3.常用染色方法 4.曲霉菌属镜下形态和菌落特点 5.病例分析 医学重要的霉菌分类 霉菌 曲霉属 非曲莓属 烟曲霉 非烟曲莓镰刀菌属暗色孢莓赛多孢属接合菌纲 黄曲霉茄病镰刀菌链格孢霉属尖端赛多孢根霉属 已位 黑曲霉尖孢镰刀菌双极菌属多育赛多孢 毛赛属 土曲霉 厅氏 根毛莓属 构巢曲霉 弯孢属十 犁田头霉属 小克银汉霉属 合格痰标本 ·含12种不同细菌,可考虑 细胞数/低视野 继续培养,结果可根据病 分类 扁平上皮细胞 情再作分析 25 10 ·超过3种细菌,按不合格 10-25标本处理 中华检验医学杂志,2000,23(5):312 真菌标本的接种 呼吸道标本,肺泡灌洗液 三区划线 28℃孵箱,5天 培养基用封口膜 密封好 无菌体液 (脑脊液 怀疑生长缓慢菌 穿刺液、骨髓、玻璃体等) (如组织胞浆菌 ),延长培养时 间至30天 怀疑真菌生长, 无菌体液1-5m打入 点种 真菌/分枝杆菌血培养瓶 真菌培养宜使用含和不含抗菌药物的两类培养基。经空气传播 高度感染性的真菌样品、含菌丝体的真菌应在生物安全柜内 CNAS-CL42 理。若采用平皿培养,应封盖。 2012 ③培养基选择 沙保罗培养基SDA 马铃薯培养基PDA CHROMagar念珠菌 显色培养基 沙保罗琼断谱养基 真菌培养物形态学鉴定 ·菌落形态(菌落大小、形态、色素、颜色和质地) ·显微镜下真菌孢子、菌丝、产孢等特征性结构进 行初步判断真菌种属。 遇到疑难的丝状真菌,应请专业组内多名技术人 员观看、讨论,以确定种属。 每次观察的菌落特征均需要记录、并照下显微镜 下的形态特征和菌落。 ·参考图谱或网上咨询 形态学鉴定 菌落形态观察 酵母型菌落 ·类酵母型菌落 丝状型菌落(正、反) 双相真菌 显微镜检査 有隔或无隔 分支或不分支 有色或无色 常见显微镜检查方法 ·K○H压片法(直接镜检) 墨汁染色 乳酸酚棉兰染色 六胺银染色 ·革兰染色:回顾性看有利于诊断 显微镜检查方法 KOH压片:皮屑、毛发、指甲、脓液、痰 等标本置于载玻片上,加一滴10-20%KOH 盖上盖玻片镜检,加热30-60s,镜检先低 倍后高倍(在KOH中加入刚果红1:1,更有 利于真菌检测)