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通用基因组DNA提取试剂盒使用说明 货号：D2100 规格：50T/ 100T 保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。开封后请将 RNase A，蛋白酶K 于-20℃保存。 试剂盒内容： D2100-50T D2100-100T RNase A 1ml × 1ml 2 蛋白酶 1ml × K 1ml 2 溶液A 25ml 50ml 溶液B 25ml 50ml 漂洗液 15ml × 15ml 2 洗脱液 15ml 30ml 吸附柱 50 个 100 个 收集管 50 个 100 个 说明书 1 份 1 份 产品简介: 通用基因组DNA提取试剂盒为通用型，适合于从土壤，粪便，昆虫，以及其他样本中提取基 因组DNA。对细菌，真菌，昆虫等样本都具有很好的裂解效果，最大限度的保留了生物DNA 的多态性。 使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、 文库构建、Southern 杂交等实验。 操作步骤： 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使 用台式离心机在室温下离心。 1、样品的处理： 1）土壤：称取0.1-0.3g (根据干湿)土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研 磨，重复3 次，使土壤颗粒研成粉末，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 2）粪便：称取0.1-0.3g (根据干湿) 粪便，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 3）昆虫：称取0.1-0.3g 昆虫，倒入适量的液氮，立即研磨，重复3次，使昆虫研成 粉末，加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 4）未知样品，如为细未状，可直接称取0.1-0.3g(根据干湿)加500ul溶液A，如为 块状，可0.1-0.3g用液氮研磨成粉未，再加500ul溶液A，振荡至彻底悬浮。 2、向悬浮液中加入20ul的RNase A （10mg/ml），55℃放置 10min。 3、加入20ul的蛋白酶K （10mg/ml），充分混匀，55℃水浴消化，30min。消化期间可颠倒 离心管混匀数次，12000转离心10min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀，可再 次离心。 4、加入500ul溶液B，充分混匀。如出现白色沉淀，于55℃放置5min，沉淀即会消失，不 影响后续实验。如溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能导致提取的DNA量少及不纯， 还有可能导致上柱后堵柱子，请增加消化时间。 5、加入500ul无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA 的提取，可将 溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，放置2min (分两次加入，每次700ul)。 6、12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心 1min，弃废液，将吸附柱放入收集