兽药检测技术 薄层色谱鉴别技术 8薄层色谱鉴别技术.pptVIP

薄层色谱鉴别技术 一、基本理论 兽药检测技术 薄层色谱法（TLC）是将固定相（如硅胶、氧化铝等）均匀地涂铺在光洁表面的玻璃、塑料或金属板上形成薄层，由于混合物中的各个组分对固定相的吸附能力不同，当流动相流经吸附剂时，发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前移动，吸附力强的组分滞留在后，经过一段时间的展开，不同的物质彼此分开，最后形成相互分离的斑点，从而将样品进行分离的方法。 1.原理 薄层色谱鉴别技术 一、基本理论 兽药检测技术 2.比移值Rf 薄层色谱鉴别技术 一、基本理论 兽药检测技术 2.比移值Rf 物质不同，结构和极性各不相同，其Rf值也不同。因此利用Rf值可以对物质进行定性鉴别。当色谱条件一定时，各组分的Rf值是一常数，其值在0～1之间，可用范围是0.2～0.8。 兽药检测技术 1.制板与活化 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 玻璃表面光滑、清洁 。 硬板：加黏合剂；软板：不加黏合剂 在规定的温度烘干一定时间，目的是除去吸附在薄层上的挥发性杂质和水分，提高分离效率。 兽药检测技术 2.点样 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （1）溶剂的选择 尽量避免用水，因为水溶液斑点易扩散，且不易挥发除去。一般用甲醇、乙醇等易挥发性溶剂。 兽药检测技术 2.点样 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （2）点样量 适当的点样量，可使斑点集中，点样量过大，易拖尾或扩散；点样量过少，不易检出。 兽药检测技术 2.点样 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （3）点样工具 一般采用点样毛细管、微量注射器或自动点样器。 兽药检测技术 2.点样 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （4）点样方法 点样时应尽量使溶剂能迅速挥发，以减少色斑的扩散，每次点样后，使其自然干燥，或用电吹风机促其迅速干燥，只有干后，才能点第二次。点样时注意勿损伤薄层表面。点样不能距边太近，以避免边缘效应而产生误差。如进行制备薄层，可用条状点样法。 兽药检测技术 3.展开 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 边缘效应：同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小 展开方式：黏合薄层常用上行法展开，软板则多用倾斜上行法展开 兽药检测技术 4.检视 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （1）首先在日光下观察，划出有色物质的斑点位置。 （2）在紫外灯（254nm或365nm）下，观察有无暗斑或荧光斑点，并记录其颜色、位置及强弱。有荧光的物质或少数有紫外吸收物质可用此法检出。 兽药检测技术 4.检视 二、操作方法 薄层色谱鉴别技术 （3）荧光薄层板检测，适用于无荧光产生的物质。荧光薄层是在硅胶中掺入少量荧光物质（如硅酸锌锰）制成的板，在254nm紫外灯下，整个薄层板呈黄绿色荧光，而被测物质处呈现暗斑。 （4）既无色，又无紫外吸收的物质可用显色剂显色。显色剂包括通用显色剂（如硫酸乙醇、碘蒸气等）和专用显色剂（如茚三酮、三氯化铁等）。 兽药检测技术 三、定性应用 薄层色谱鉴别技术 薄层色谱法（TLC）是目前药典中收载最多的药品鉴别方法之一。该方法简单易行，其应用范围日益扩大。薄层色谱法进行药物鉴别的依据是不同物质在相同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为。一般采用对照法，将供试品与对照品在相同的条件下进行色谱分离，并进行比较，根据两者的色谱行为是否一致来鉴别药物。 兽药检测技术 三、定性应用 薄层色谱鉴别技术