高中生物选修三提纲(浙教版).pdfVIP

基因工程 基因工程（生物技术）是狭义的遗传工程。核心是构建重组 DNA 分子，故也称重组 DNA 技术。 工具酶的发现和基因工程的诞生 理论基础 ：1.DNA 是生物遗传物质的发现。2.DNA 双 旋结构的确立。3.遗传信息传递方式 的认定。 限制性核酸内切酶 ：能够识别和切割 DNA 分子内一小段特殊核 苷酸序列的酶。 DNA 连接酶 质粒（载体）：具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子， 在细菌之中独立于拟核之外。常用大肠杆菌质粒，这种质 粒常含有抗生素抗性基因（作为标记基因）。 除质粒外载体 有噬菌体、植物病毒和动物病毒（均 为 DNA 病毒） 基因工程的原理和技术 基本原理：让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞在稳定 和高效地表达。 基本操作步骤： 1. 获取目的基因。 目的基因的序列已知：1.化学方法合成。2.逆转录法（以 m-RNA 为模板，在逆转录酶作用下人工合成）。3.用聚合酶链式 反应（PCR）扩增目的基因。 目的基因的序列未知：从基因文库（包括 DNA 分子的所有基 因）中获取 2. 形成重组 DNA 分子 用相同的限制酶切割目的基因和载体 DNA 3. 将重组 DNA 分子导入受体细胞 常用的转化方法： 导入植物细胞：农杆菌转化法（农杆菌特点：易感染双子叶植物 和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。原理：Ti 质粒上 的t-DNA 可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的 DNA 上），其次 有 基因枪法和 花粉管通道法等。 导入动物细胞：显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。 导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多 为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ， 其转化方法是：先用氯化钙处理细胞，使其成为 感受态细胞 ，再将 重组表达载体 DNA 分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一 定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA 分子，完成转化过程。 4. 筛选含有目的基因的受体细胞 依据：标记基因（或目的基因）是 否表达 5. 目的基因的表达 目的基因是否插入：DNA 分子杂交，看是否出现杂交带 目的基因是否转录出了 m-RNA ：核酸分子杂交 目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交 个体生物学水平的鉴定：抗虫、抗病接种实验 基因工程的应用 基因工程与遗传育种（农牧业） 转基因植物：解决传统育种方法所需时间较长，且远缘亲本难 以杂交的问题。 转基因动物 基因工程与疾病治疗（医药工业和医学领域） 基因工程药物： 胰岛素（注射）：蛋白质激素，治疗胰岛素依赖型糖尿病。 传统：从猪羊的胰腺中提取。现：转入了人胰岛素原基因的大肠杆 菌，可以合成人胰岛素原，加工后得到有生物活性的胰岛素 干扰素（注射）：病毒侵入细胞后产生的糖蛋白。有抗病毒、抗 细胞分裂和免疫调节功能。传统：从人血液中提取。现：人白细胞干 扰素基因获得克隆和表达。 乙型肝炎疫苗：蛋白质。现 无特效药物治疗乙肝。现：酵母乙 肝疫苗（酵母菌），哺 乳动物细胞乙肝疫苗。 基因治疗 ：向目标细胞中引入正常功能基因，以纠正或补偿基 因的缺陷。 首例：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者有缺陷的，经过 转化、培养后可产生 ADA ，将成千 上万个转基因的 T 淋巴细胞转移到患者骨髓组织中。 技术 不成熟 基因工程与生态环境保护（环境保护领域）：工程菌 植