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3.1乙酸及乳酸的形成
酵母菌在产酒精的同时,也会产生多种有机酸,根霉菌等霉菌也产乳酸。通常在发酵前期及中期生酸量较少,后期产酸较多。白酒酒醅中形成的有机酸种类较多,产酸的途径也很多。很多有机物都能经生物化学反应生成有机酸,低级的有机酸也可逐步合成较高级的酸,醇和醛也可氧化为相应的有机酸。
3.1.1乙酸的生成
乙酸有清爽的米醋香味,在各种香型白酒中含量都较多,乙酸不仅是酒中的有一种风味物质,也是一些脂类物质的前体物质。乙酸的生成可能有以下几种途径:
3.1.1.1酵母菌酒精发酵产生乙酸
3.1.1.2醋酸菌将乙醇氧化成乙酸
3.1.1.3糖经发酵生成乙酸,再经歧化作用生成乙酸
乙酸和乙醇是同时形成的,当糖分发酵约50%时,酒醅中乙酸含量最高;在发酵后期,酒醅中酒精含量较多时,则乙酸生成量较少。通常,在酵母菌生长及发酵条件较好时,乙酸生成量较少。若酒醅中进入枯草芽孢杆菌,则乙酸生成量较多。
3.1.1.4异型乳酸菌产生乙酸
通过HMP途径的发酵——异型乳酸发酵(heterolactic fermentation),凡葡萄糖经发酵后除主要产生乳酸外,还产生乙醇、乙酸和二氧化碳等多种产物的发酵。
下面是异型乳酸发酵的经典途径:
① 葡萄糖在己糖激酶的作用下转化成6-磷酸葡萄糖;
② 6-磷酸葡萄糖在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下转化为6-磷酸葡萄糖酸;
③ 6-磷酸葡萄糖酸在6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase)作用下转化为5-磷酸核酮糖(ribulose-5-phosphate);
④ 在经5-磷酸核酮糖-3-差向异构酶(ribulose-5-phosphate-3-epimerase)的差向异构作用生成5-磷酸木酮糖(xylulose-5-phosphate);
⑤ 5-磷酸木酮糖在磷酸酮解酶(phosphor01ysis ketonase)的催化作用下可分解为乙酰磷酸(acetyl phosphate) 和3-磷酸甘油醛。
⑥ 乙酰磷酸经磷酸转乙酰酶(phosphotransacetylase)作用转化为乙酰CoA,再经乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase)和乙醇脱氢酶(aclhoidehydrogenase)作用最终生成乙醇;
⑦ 甘油醛-3-磷酸经EMP途径生成丙酮酸,在乳酸脱氢酶的催化作用下转化为乳酸。
通过6-磷酸葡萄糖酸异型乳酸发酵途径,1分子葡萄糖最终可转化为1分子乳酸和1分子乙醇,从而得出乳酸对糖的理论转化率为50%。
3.1.2 乳酸的生成
乳酸是含有羟基的有机酸,它也可由多种微生物产生。
3.1.2.1由乳酸菌发酵生成乳酸
乳酸菌(1actobacillus)在无氧条件下时,丙酮酸就会接受从3一磷酸甘油醛脱下的由NADH携带的氢,在乳酸脱氢酶(1actate dehy.drogenase,LDH)催化下形成乳酸。
乳酸发酵是严格的厌氧发酵,乳酸发酵可以用于奶酪、酸奶、食用泡菜及青贮饲料等行业生产中。乳酸发酵包括同型乳酸发酵和异型乳酸发酵两种类型。
(1)同型乳酸发酵
经EMP途径。
同型乳酸发酵(homolactic fermentation)是指嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、德氏乳杆菌(Lnc.delbriikii)等乳酸杆菌利用葡萄糖经糖酵解途径生成乳酸的过程。因为乳酸杆菌大都没有脱羧酶,所以糖酵解途径产生的丙酮酸就不能通过脱羧作用而生成乙醛,只有在乳酸脱氢酶催化作用下(需要辅酶I),以丙酮酸作为受氢体,发生还原反应而生成乳酸。由此可以得出,葡萄糖经同型乳酸发酵的总反应式为:
C6 H 12O6+2ADP+2Pi——+2CH3CH(OH)COOH+2ATP
1分子葡萄糖生成2分子乳酸,理论转化率为100%
(2)异型乳酸发酵
异型乳酸发酵(heterolactic fermentation)除生成乳酸外还生成CO2和乙醇或乙酸。其生物合成途径也有两种:6-磷酸葡萄糖酸途径和双歧(bifidus)途径,前者的代表菌株有肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)及葡聚糖明串珠菌(L.dextranicum),后者代表菌株为双歧杆菌(Bi fidobacterium bifidum)。
① 6-磷酸葡萄糖酸生成乳酸和乙醇途径:(见右图)
1mol葡萄糖生成1mol乳酸和1mol乙醇。乳酸对糖的理论转化率是50%。
② 葡萄糖经双岐途径发酵生成乳酸和乙酸:(见右图)
该途径的特点是:有两个磷酸酮解酶参与;在没有氧化作用和脱氢作用的反应参与下,2分子葡萄糖分解为3分子乙酸和2分子3-磷酸甘油醛。接着,在3-磷酸甘油醛脱氢酶和乳酸脱氢酶的参与下,3-磷酸甘油醛转变为乳酸。
③同型乳酸发酵与异型乳酸发酵的
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