DB37∕T 1826-2011 猪圆环病毒2型环介导等温扩增技术(山东省).pdfVIP

TCS 65. 020. 30 B 43 DB37 东 h E tTJ 巳 省 标 准 方 山 DB 37/ T 1826一-2011 猪圆环病毒2 型环介导等温扩增技术 Loop-mediated isothermal amplification for porcine circovirus type 2 2011 - 04 - 08 发布 2011 - 06 - 01 实施 发布 山东省质量技术监督局 DB37/ T XXXX--XXXX 目IJ 1=1 本标准的编制依据GB!T 1. 1-2009 的规足。 本标准由山东省农业科学院提出。 本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。 本标准主要起草单位:山东省农业科学院畜牧兽民研究所:青岛农业大学。 本标准主要起草人:王金宝、李俊、吴家强、韩f忠、时建立、用JI[页、丛晓燕、徐绍建、我l、文|尊、杜 以军。 DB37/ T XXXX--XXXX 猪圆环病毒 2 型环介导等温扩增技术 1 范围 本标准规定了猪圆环病毒2型 (PCV2) 的环介导等温扩增 (LAMP) 检测技术的要求。 本标准适用于猪由洁和组织中猪圆环恼毒2型的检测。 2 材料 2. 1 器材 2. 1. 1 微量移液器(最大量程为 10μL、 20μL、 100~L、 1000μL) 2.1.2 20000g 低温离心机 2. 1.3 电热恒温水槽 2.1.4 稳流稳压电泳仪 2. 1.5 水平电泳槽 2. 1.6 凝胶成像系统 2. 2 紫外透射反射分析仪试剂 2.2.1 蛋白酶K 溶液 C20mg/mL) 配制见附录A. 1 章 2. 2. 2 10%十二炕基硫酸铀 (SDS 溶液，而7.2) 配制见附录A. 2 章 2.2.3 Tris 平衡酌 2. 2. 4 二氧甲炕 2. 2. 5 无水乙醇 2. 2. 6 70% 乙醇:配制见附录 A. 3 章。 2. 2. 7 5mo1/L Betaine 溶液:配制见附录A. 4 章 2. 2. 8 100mmo l/L MgS04 溶液: 配制见附录A. 5 章 2.2.9 Bst DNA Po1ymerase (8U/μL) 2. 2. 10 SYBR Green 1 核酸染料 2. 2. 11 O. 5X TBE 缓冲液:配制见附录A. 6 章。 2.2.12 电泳级 1%琼脂糖:配制见附录A. 7 章。 2.2.13 10 mg/mL 的澳化乙链 (EB) 水溶液。 2.2.14 DNA Marker 2000 2. 3 引物 F3: 5-CTCCAGTGCTGTTATTCTAGATGA-3 , B3: 5一TTTCCAGCAGTTTGTAGTCTCA-3 FIP: 5-GAAGGGCTGGGTTATGGTATGGC-TTTT-ACAGCC