四川部分地区成年山羊十二指肠贾第虫与隐孢子虫的感染调查.pdfVIP

摘 要 十二指肠贾第虫（Giardia duodenalis）和隐孢子虫（Cryptosporidium）是两种 重要的人兽共患肠道原虫，其宿主范围十分广泛，可感染包括人在内的多种动物， 引起人和动物的慢性腹泻和肠道应激综合征，对动物的生长发育产生不良影响，给 养殖业造成严重的经济损失。羊是我国重要的经济动物，目前国外已有许多关于羊 感染Giardia duodenalis 和Cryptosporidium 的报道，但国内的研究很少，而四川地 区尚未见到关于山羊Giardia duodenalis 与Cryptosporidium 的感染调查和基因分型 研究。本研究对四川省部分地区不同养殖模式下成年山羊 Giardia duodenalis 和 Cryptosporidium 的感染情况以及基因型进行分析，为四川地区山羊隐孢子虫病和贾 第虫病的防控提供基础数据。 本试验于2017 年6 月至2017 年 11 月于四川部分地区采集 15 个养殖场 （7 个 规模化养殖场与8 个散养场）共364 份圈养成年山羊 （18-24 月龄）粪便样品，提 取DNA ，然后通过巢式PCR 扩增 Giardia duodenalis 的β -giardin （bg ）基因、tpi 及gdh 基因和Cryptosporidium 的18S rRNA 基因，扩增产物测序并进行系统进化树 分析，获得以下结果： 1、成年山羊Giardia duodenalis 总感染率为15.1% （55/364 ），不同地区成年山 羊 Giardia duodenalis 感染率存在极显著显著 （P ＜0.01 ），规模化养殖场感染率为 22.4% ，散养场感染率为8.4%，不同养殖模式下的感染率差异显著（P ＜0.05 ），；序 列分析与系统进化树分析表明，此次成年山羊感染的Giardia duodenalis 基因型均为 集聚体E ，其中在bg、tpi 和gdh 三个基因位点分别成功鉴定出4 （E5 、E8 、E17 和 E18 ），2 （E2 和E4 ），2 （E3 和E4 ）种基因亚型，并且在bg 位点发现2 种新基因 亚型（E17 和 E18 ）；对 bg、tpi 和gdh 采用多位点序列分型(MLG)表明，共有 31 株分离株在 3 个位点均扩增成功，形成3 个新的MLG 亚型（MLG-E1, E2, E3(sc) ）。 2 、成年山羊 Cryptosporidium 的总感染率为 4.9% （18/364 ），6 个感染 Cryptosporidium 的养殖场均为散养模式养殖场，分析表明不同地区和不同养殖模式 下成年山羊Cryptosporidium 感染率存在极显著差异 （P ＜0.01 ）；序列分析与系统进 化树分析表明，感染的Cryptosporidium 虫种类型为C. xiaoi 和 C. suis，并以C. xiaoi 为主；本次试验首次在成年山羊中检出C. suis 虫种，进一步扩大了该虫种的宿主范 围。 I 综上所述，被调查地区成年山羊存在Giardia duodenalis 和Cryptosporidium 感 染，不同养殖模式下Giardia duodenalis 和Cryptosporidium 的感染率均存在显著差 异。成年山羊感染的Giardia duodenalis 基因型为集聚体E ，且在bg 位点检测到2 种新基因亚型（E17 和E18 ）；成年山羊感染Cryptosporidium 虫种为C. xiaoi 和 C. suis （具有人兽共患性）；首次在山羊上检出的C. suis 虫种进一步扩大了该虫种的宿主 范围。 关键词：成年山羊；十二指肠贾第虫；隐孢子虫；多位点基因分型；18S rRNA基因 II Abstract Giardia duodenalis and Cryptosporidium a