药品生物检定技术 生物制品检查法的基本概念及检查方法 溶血与凝聚检查法.ppt

* 溶血与凝集检查法 药品生物检定技术- 生物制品的生物测定法 学习要求 掌握 熟悉 1、溶血与凝聚检查法的概念 2、溶血与凝聚检查法的操作流程 1、溶血与凝聚检查法的目的 2、溶血与凝聚检查法的判断方法 主要内容 溶血与凝聚检查法 溶血与凝聚检查法的概念 本法系将一定量供试品与2%的家兔红细胞混悬液混合，温育一定时间后，观察其对红细胞状态是否产生影响的一种方法。 一、溶血与凝聚的新方法 比色法 红细胞计数与形态观察法 有色供试品溶液溶血检查比色法测定 鼠体内溶血试验研究 方法: 2%兔红细胞 37℃水浴3h 被检查物 肉眼观察 优点： 1 、排除纤维蛋白等内源性物质的干扰； 2 、简便、快捷 缺点： 1、肉眼观察:主观性、偶然误差 2、颜色等因素干扰结果的判断 二、比色法 若肉眼观察上清液不能判定是否有溶血发生时，则将各管以每分钟1500转离心10分钟，取上清液在分光光度计上，545nm处进行比色，以0.9%氯化钠溶液为空白读取各管的吸光度值（OD），以下列公式计算溶血百分率： 溶血百分率（％）＝（ODt－ODnc）/(ODpc－ODnc) ×100％ 式中：ODt：供试品溶液管吸光度值； ODnc：阴性对照管吸光度值； ODpc：溶血阳性对照管吸光度值。 若溶血百分率小于5%则表明无溶血发生。 三、红细胞计数与形态观察法 肉眼观察 红细胞计数 血液分析仪 血细胞计数板 显微镜下形态观察 数量、形态（皱缩、碎片、边缘轮廓不清晰等） 举例:痰热清注射液溶血实验研究 肉眼观察 Nacl镜下20×10 H2O镜下20×10 *