河南华溪蟹ShToll1和ShToll3对镉暴露和嗜水气单胞菌攻毒的免疫应答研究.pdf

目 录 中 文 摘 要 I ABSTRACT i 第一章 综 述1 1.1 Cd 与免疫及信号通路 1 1.1.1 Cd 与免疫的关系 1 1.1.2 参与Cd 应答的信号通路 1 1.2 Toll 的免疫功能3 1.2.1 Toll 的发现与结构3 1.2.2 Toll 的种类与功能3 1.2.3 Toll 的参与的免疫应答4 1.3 无脊椎动物Toll 相关研究进展4 1.3.1 昆虫4 1.3.2 甲壳动物5 1.3.3 软体动物6 1.3.4 线虫7 1.4 本学位论文的研究意义与研究内容7 1.4.1 研究意义7 1.4.2 研究内容8 第二章 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因的克隆、生物信息学分析与组织表 达模式11 2.1 材料与方法 12 2.1.1 实验材料 12 2.1.2 实验方法 14 2.1.3 数据统计与分析 17 2.2 结 果 17 2.2.1 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因cDNA 全长序列及蛋白结构域 分析 17 2.2.2 河南华溪蟹 ShToll1 和 ShToll3 氨基酸序列系统进化树与 LRR-TM-TIR 结构25 2.2.3 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因的组织分布情况33 2.3 讨 论33 2.3.1 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因序列结构33 2.3.2 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因在各组织的分布情况34 2.4 小 结35 第三章 河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因应答嗜水气单胞菌攻毒的表达模式 37 3.1 材料与方法38 3.1.1 实验材料38 3.1.2 实验方法40 3.1.3 数据统计与分析41 3.2 结 果42 3.2.1 嗜水气单胞菌与金黄色葡萄球菌毒力基因42 3.2.2 嗜水气单胞菌菌落形成单位及与OD600 关系42 3.2.3 嗜水气单胞菌攻毒河南华溪蟹半数致死剂量LD5043 3.2.4 嗜水气单胞菌攻毒河南华溪蟹Shtoll1 和Shtoll3 基因免疫应答.44 3.3 讨 论48 3.3.1 嗜水气单胞菌毒力基因48 3.3.2 嗜水气单胞菌攻毒模型49 3.4 小结49 第四章 河南华溪蟹ShToll1 和ShToll3 基因应答Cd 暴露和嗜水气单胞菌攻毒的 表达模式51 4.1 材料与方法51 4.1.1 实验材料51 4.1.2 实验方法54 4.1.3 数据统计与分析55 4.2 结 果55 4.2.1 Cd 胁迫及嗜水气单胞菌攻毒河南华溪蟹Shtoll1 基因免疫应答..56 4.2.2 Cd 胁迫及嗜水气单胞菌攻毒河南华溪蟹Shtoll3 基因免疫应答..57 4.2.3 高浓度Cd 胁迫及嗜水气单胞菌攻毒河南华溪蟹ShTol