常用培养基的配制.pdf

附录三 常用培养基的制备 目 录 一、肉浸液肉汤 二、营养琼脂 三、鲜血琼脂 四、半固体培养基 五、明胶培养基 六、乳糖胆盐发酵培养基 七、乳糖发酵培养基 八、缓冲蛋白胨水（BP） 九、氯化镁孔雀绿增菌液（MM） 十、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB） 十一、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC） 十二、GN 增菌液 十三、肠道菌增菌肉汤 十四、HE 琼脂 十五、SS 琼脂 十六、麦康凯琼脂 十七、伊红美蓝琼脂（EMB） 十八、三糖铁琼脂（TSI） 一、肉浸液肉汤 （一）成份 十九、三糖铁琼脂（换用方法） 二十、血消化汤 二十一、克氏双糖铁琼脂（KI） 二十二、克氏双糖铁琼脂（换用方法） 二十三、动力硝酸盐增养基（A 法）（SPS） 二十四、动力硝酸盐培养基（B 法） 二十五、马丁氏肉汤 二十六、察氏培养基 二十七、马铃薯萄萄糖琼脂（PDA） 二十八、马铃薯琼脂 二十九、Elek 氏培养基（毒索测定用） 三十、胰蛋白胨水 三十一、3.5％氯化钠三糖铁琼脂 三十二、牛肉（或中心）消化汤 三十三、0.1％蛋白胨水稀释剂 一、肉浸液肉汤 （一）成份 绞碎牛肉 500g 蛋白胨 10g 磷酸氢二钾 2g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000 ml （二）制法 将绞碎之去筋膜无油脂牛肉 500g 加蒸馏水 1000ml，混合后放冰箱过夜，除 去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液， 加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正 pH7 ．4 ～7 ．6 煮沸并过滤，分装 烧瓶，121℃高压灭菌 30 分。 （三）用途 一般细菌培养用。 二、营养琼脂 （一）成份 肉水 1000ml 蛋白胨 10g 磷酸氢二钾 1g 氯化钠 5g 琼脂 20 ～30g （二）制法 先将琼脂剪碎，用冷水洗净后加入肉汤中，划线补充水分，加热溶化。校正 pH7.4 ～7.6，用纱布夹棉花过滤至透明。分装中试管或三角瓶。高压灭菌 121℃20 分，灭菌后 中试管摆成斜面。 （三）用途 一般细菌的分离培养，纯培养，观察菌落性状及保存菌种用。为特殊培养基 的基础。 三、鲜血琼脂 （一）成份 营养琼脂 脱纤维鲜血（马、绵羊、牛、家兔）5 ～8％。 （二）制法 将灭菌的营养琼脂加热溶化，冷至 45 ～50℃时，加入无菌脱纤维鲜血 5 ～8％， 分装试管，即摆成斜面或倾注平皿，待凝固后，置 37℃培养 1 日，有污染者废弃，无菌者保 存于冰箱备用。 无菌脱纤维鲜血：以无菌手术采取健康动物（马、绵羊、牛用颈静脉采血、家兔用心脏采 血）血液，加到盛有玻璃殊的三角瓶内，摇匀 5 ～10 分钟，置冰箱中备用。 （三）用途 用于分离培养和保存菌种。 四、半固体培养基 （一）成份 肉汤培养基（pH7.4 ～pH7 ．6） 100 ml 琼脂 0.3g （二）制法 将琼脂加入肉汤培养基中加热溶化，校正 pH 至 7 ．6，滤过后分接于试管内， 以 15 磅高压灭菌 20 ～30 分钟，作成高层，经无菌检查合格后，置冰箱中保存备用。 （三）用途 菌种保存，观察细菌的运动性。 五、明胶培养基 （一）成分 普通肉汤 100 ml 明胶 12 ～15g （冬天少用，夏天多用） （二）制法 将上述成分加热溶化，校正 pH 至 7 ．6，趁热过滤，分装试管，用 8 磅 15 分钟灭菌或流通蒸气 100℃，30 分钟间歇，灭菌，经无菌检验合格的保存于冰箱内备用。 六