7.9 菌种的衰退和复壮.pdf

第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 一、菌种的衰退与复壮 菌种性状稳定 这是微生物学工作最重要最基本的要求 微生物的突变率10－10～10－5 正变体 （极少数）进步 负变体 （大多数）衰退 1.衰退的定义 菌种衰退 （菌种退化 ）： 由于自发突变，使菌种的生物学性状 发生量变或质变的现象。 菌种原有的典型性状变得不典型了。 微生物细胞群 菌种的衰退 微生物细胞群 量变 逐步演化过程 质变 2. 衰退的具体表现 ① 原有形态性状变得不典型了； ② 生长速度变慢，孢子变少； ③ 生产能力下降，即出现负变； ④ 致病菌对宿主侵染力的下降； ⑤ 对不良环境的抵抗能力下降。 3. 衰退的原 因 造成菌种退化的主要原因是基因突变。 生产工艺条件 控制不当 造成生产性能 误区 下降 杂菌污染 饰变 （一）衰退的防止 （1）选性能稳定的菌株作生产菌株 诱变后的菌种要连续传代、分 诱变处理 离纯化，防止分离回复。 （2）控制传代次数 尽量避免不必要的移种和传代， 将必要的传代降到最低限度，减少 自发突变几率。 （3）创造良好的培养条件 创造一个适合原种的生长条件，就 可在一定程度上防止菌种衰退； 例如，给予营养缺陷型适当的 营养必需成分，可降低回复突 变频率。 （4）利用不易衰退的细胞传代 放线菌和霉菌一般用单核的孢子 接种，细胞是异核体，用于接种就 易出现衰退。 （5）采用有效的菌种保藏方法 菌种保藏的温度、所用的培 养基等可影响自发突变。 菌种保藏的重要性 （二）菌种的复壮 （rejuvenation ） 狭义的复壮： 一种消极的措施 广义的复壮： 一项积极的措施 狭义的复壮： 是指菌种已衰退后，通过纯种 分离和测定典型性状、生产性能等 指标，从已衰退的群体中筛选出少 数尚未退化的个体，以达到恢复原 菌株固有性状的相应措施。 • 长久保存的菌种在启用时，要经移种至 适宜的培养基上进行培养，待生长后再 行移种，如此连续2-3次，甚至多次，直 至出现典型的形态和生化特征为止。 广义的复壮： 在菌种的典型特征或生产性状尚 未衰退前，就经常有意识地采取纯 种分离和生产性状的测定工作，不 仅可以防止退化，还可以从中选择 到自发突变的正变个体。 复壮的方法： 1. 纯种分离法 （pure culture isolation ） 2. 通过宿主体复壮 3. 淘汰已衰退的个体 1. 纯种分离法 粗放 精细 激光镊子技术 有缘学习更多+谓ygd3076或关注桃报：奉献教育（店铺） （1）平板表面涂布法 p将打散的适量稀释的待分离的菌悬液加 到平板上，用涂棒 涂布均匀，培养。 p达到单菌落分离 目的。