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职业教育医学检验技术专业教学资源库
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
宜春职业技术学院 王宜萍
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
色谱体系
固定相
流动相
待分离溶质
性质
决定
分离效果
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
以固体吸附剂作固定相,应具备以下特点:
常用:氧化铝、硅胶、聚酰胺、大孔吸附树脂等
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
① 硅胶
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
100~200目
具微酸性,适于酸性和中性物质
105-110℃加热30min
水与硅醇基结合使其失去活性
表面的硅醇基,与物质形成氢键
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
根据氧化铝的含水量可将活性分为五级。
② 氧化铝
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
吸附剂的活性和含水量有一定的关系:
(1)含水量愈高,其吸附活性愈低,(2)活性级数愈大,吸附力就愈弱。
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
小结-----氧化铝:强极性吸附剂
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
③ 聚酰胺
分离机制:主要是氢键吸附
适用对象:酚类、酸类、硝基、黄酮类
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
吸附性:是由于范德华力或产生氢键吸附。
筛选性:是来源于它的多孔性网状结构。
主要应用于:水溶性化合物的分离提纯。
④ 大孔吸附树脂
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
流动相洗脱的过程实质:就是流动相分子与被分离的组分分子竞争占据吸附剂表面吸附活性中心的过程。
流动相的要求
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
流动相的洗脱能力主要由流动相的极性决定
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
3、选择原则
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
吸附柱色谱法的固定相和流动相选择
组分极性
吸附剂活度
流动相极性
大
小
大
小
大
小
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