qPCR实验从设计primer开始到-计算方法详例.docVIP

本人在日本留学 虽然对于具体的原理不是特别理解，现把详细的实验大家来参考。  real time PCR的实验方法写出来让 第一步：  primer 设计 Primer design: Find out the mRNA of related gene, for example: Mus musculus transgelin(Tagln) SM22a, mRNA NCBI Nucleotide GenBank open the website of Primer-Blast Enter accession, gi, or FASTA NCBI Reference Sequnece:NM_011526.5 , range 2. 3. Write the organism that you use for mice for homo sapiens, mice: Mus musculus (taxid:10090) Primer pair 1 Sequence (5-3) Template strand Length Start Stop Tm GC% Self Forward primer GCTTTGGGCAGTTTGGCTGT Plus 20 631 650 62.03 55.00 3.00 Reverse primer TCTTATGCTCCTGGGCTTTCTTCA