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分子生物学复习纲要 核酸的分子结构、性质 和功能 核酸：由许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物 核酸的化学组成：脱氧核糖核酸或核糖核酸，单个核苷酸是由含氮有机碱(称碱基)、戊糖(即五碳糖)和磷酸三部分构成的 DNA与RNA的异同：化学组成 DNA的结构与功能：DNA与蛋白质一样，也有其一级、二级、三级结构 DNA的一级结构，指 DNA分子中核苷酸的排列顺序。由于核苷酸的差异主要表现在碱基上，因此也叫做碱基序列。 DNA的二级结构 DNA分子由两条反向平行的多聚核苷酸链围绕同 DNA链的骨架由交替出现的亲水的脱氧核糖基和磷酸基构成，位于双螺旋的外侧，碱基配对位于双螺旋的内侧 两条多聚核苷酸链以碱基之间形成氢键配对而相连，即A与T配对，形成两个氢键，G与C配对，形成三个氢键。碱基相互配对又叫碱基互补。 碱基对平面与螺旋轴几乎垂直，DNA两股链之间的螺旋形成凹槽：一条浅的，叫小沟；一条深的，叫大沟。大沟是蛋白质识别DNA的碱基序列发生相互作用的基础，使蛋白质和DNA可结合而发生作用。 DNA双螺旋结构的稳定主要由互补碱基对之间的氢键和碱基堆积力来维持。碱基堆积力是碱基对之间在垂直方向上的相互作用，可以使DNA分子层层堆积，分子内部形成疏水核心，这对DNA结构的稳定是很有利的，碱基堆积力对维持DNA的二级结构起主要作用。 DNA三级结构 1超超螺旋——原核生物DNA的三级结构 　　 2.真核细胞基因组DNA DNA的功能：作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板，是生命遗传繁殖的物质基础，也是个体生命活动的基础。 RNA的结构与功能 RNA通常以单链形式存在，这与DNA双链形成螺旋不同，但也可以有局部的二级结构或三级结构。RNA分子比DNA分子小，它的功能多样，种类较多，主要有信使RNA、核蛋白体RNA、转运RNA、小核RNA及核不均一RNA等。 信使RNA（mRNA）：在细胞核内以 DNA单链为模板转录生成hnRNA,hnRNA经过剪切变为成熟的mRNA,出核后在胞质内为蛋白质合成提供模板 核蛋白体RNA(rRNA)的结构与功能 rRNA是细胞内含量最多的RNA，与核糖体蛋白共同构成核糖体——蛋白质的合成部位，参与蛋白质的合成。核蛋白体由大亚基和小亚基组成。 转运RNA(tRNA)：三级结构 其他类型的RNA：如小核 RNA（snRNA）参与hnRNA的加工。还有一类RNA分子本身具有自我催化功能，可完成rRNA的剪接。这种具有催化作用的RNA被称为核酶。要与核酸酶区别，后者是指可水解核酸的酶，故按照底物不同可分为DNA酶和RNA酶。 DNA的超螺旋： DNA超螺旋是DNA在形成双链以后再次螺旋形成的,有正超螺旋,负超螺旋.一般的生命体是负超螺旋,可以减少DNA螺旋的圈数.正超螺旋可以增加螺旋数,有些细菌和病毒是正超螺旋 RNA短双螺旋结构 分子间三链：根据第三条链的来源，三链又可分为分子内和分子间两大类：分子内的三链DNA是由一条链通过自身回折形成的，分子间的又分为两种： ①由一条单链与发夹结构或环状单链所形成，②由一条单链与线状双链形成。 核酸的变性：核酸变性是指核酸双螺旋结构解开，氢键断裂，但并不涉及核苷酸间磷酸二酯键的断裂（磷酸二酯键的断裂称为降解） 热变性，酸碱变性，尿素、甲酰胺 变性后的理化性质变化：粘度下降，沉降速度增加+增色效应 核酸的复性：变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分离的链重新缔合而形成双螺旋结构，这一过程称为复性或退火（理化性质恢复，生物活性部分恢复） 探针：带有某些标记物的，能够与靶分子核酸按碱基互补原则特异性相互作用的一段已知序列的寡核苷酸或核酸----升级版：生物芯片（分析靶分子的序列和数量） 原位杂交：用标记的DNA或RNA为探针，在组织或细胞水平上,使用探针与细胞内DNA或RNA杂交，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法 反义核酸：根据碱基互补原则，用人工合成或生物合成的特定互补DNA或RNA片段（或其化学修饰产物），这类特异的核酸片段能够与目的序列结合，通过空间位阻效应或诱导RNAase活性，在复制、转录、剪接、mRNA转运及翻译水平抑制或封闭目的基因的表达。（抑制和封闭）肽核酸====PNA（代谢障碍引起毒副作用） 反义核酸的靶区域： 1． mRNA 5’ 2． mRNA 5’ 3． mRNA 5’ 4． 前体mRNA外显子与内含子结合部位 5． mRNA PolyA形成位点 6． 阻止mRNA的成熟及其向胞浆中的转运 15.分子杂交的应用： Southern 印迹 ? Northern印迹 ? Western印迹（蛋白印迹） ? 原位杂交 ? 生物芯片—— 基因芯片 染色质、染色体、基因和基因组 主要成分均是DNA和蛋白质。是同一物质在间期和