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院感监测项目 一 空气监测(布点法 ): ①室内面积 ≤ 30cm 2, 设内外中三个点 ; 室内面积 30 cm2 设 5 个点 ②用直径 9 cm 的琼脂平板分别于上述布点位置 , 采样时将平板打开, 扣于平板旁 , 暴露时间为 5 分钟, 盖好立即送检 . ③平板置 35-37 度 48 小时培养 ④计算公式: 细菌总数 (cfu/m 3=50000N/A.T)A 为平板面积 ,T 为平板暴露时间,N 为平均菌落数 即: 菌落数 / 平板数 *换算系数 换算系数 ( 直径 9 cm 平板) 5 分钟*157; 10 分钟*78; 15 分钟*52; 30 分钟*26 手术室报告方式: 个/30min ?90 二 医务人员手监测 ①手的采样 : 被检人五指并拢, 用生理盐水浸湿棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2 次( 一只 手涂面积约为 30 cm 2), 剪去操作者手触部位 , 将拭子放入 10ml 洗脱液中 ②细菌总数监测: 将采样管用力振打80次, 用无菌管吸取 1ml 于灭菌平皿内 , 加入 5ml 营养琼脂 , 摇均 , 待琼脂凝固后, 于 37 度 48小时培养 , 计数菌落数 . 计算 : 细菌总数 (cfu/ cm 2)= 平板上菌落数 *稀释倍数 /60 cm 2 结果判定: 3 环境类别 空气 cfu/ cm 2 物表 cfu/ cm 医务人员手 cfu/ cm 2 Ⅰ类 ( 层流洁净室 ) ≤ 10 ≤ 5 ≤ 5 Ⅱ类区域( 普通手术室 产房 婴儿 ≤ 200 ≤ 5 ≤ 5 室 人工肾烧伤科 重症监护) Ⅲ类 ( 儿科 注射室换药室等) ≤ 500 ≤ 10 ≤ 10 Ⅳ类 ( 传染科及病房 ) - ≤ 15 ≤ 15 注意 : ①不得检出乙型链球菌 金黄色葡萄球菌 及其它致病菌 ②母婴同室 , 婴儿室 , 新生儿室及儿科病房的工作人员手上不得检出沙门氏菌铜绿金葡 . 三 物表监测 采样 : 用 5*5 cm 2的方框取样 4 个不同位置 , 其余方法同手表检测 细菌总数及其他方法无同手表检测 计算 : 细菌总数 (cfu/cm 2)= 平板上菌落数 *稀释倍数 / 采样面积 (cm2) 结果判定: 同手表 四 A一次性物品 ( 无菌 ) : 取 5-10 套样品用洗脱液洗脱后, 各吸取 1.0ml 接种于平板 ,35-37 度培养 3-5 天, 不得检出细菌 . B 无菌物品: 取供试品 2 个包装, 拆开后于不同部位剪取约 1cm*3cm的样品放入增菌液 , 如果有菌生长 , 转平板. 不得检出细菌 五 消毒剂: 吸取 1ml 正在使用中的消毒剂加入 9ml 肉汤中( 含有相应中和剂 ) 振 80 次后吸入 1.0ml 于 灭菌平皿内 , 加入 5ml 营养琼脂, 摇均, 待琼脂凝固后 , 于 37 度48 小时培养, 计数菌落数 . 报告:cfu/ml 结果判定:100 cfu/ml 六 透析水:1. 取透析水 1ml 于无菌平皿 , 加入 56 度琼脂, 冷却后于 37 度 48 小时作细菌总数计数 . 结果判定: 出口水200 cfu/ml 入口水200 cfu/ml 报告:cfu/ml 注: 氧气湿化瓶液监测同上 , 结果判定 :1000 cfu/ml, 不得检出致病菌 克氏双糖培基 配制方法 : 取 克氏双糖商品化干粉培基 55g，加入装有 1000ml 蒸溜水的三角烧瓶中，加热溶解 , 调 PH7.8, 分装小试管 (约 2.5ml), 12 磅 15分钟灭菌。 Ｖ－Ｐ培养基 : 成份：酵母浸肉膏 0.2g, 胰蛋白胨 1.4g, 大豆蛋白胨 1.0g, 葡萄糖 2.0g, NaCl1.0g, 蒸溜水 200ml 制法： 将上述成份加热溶解 , 调 PH7.0, 分装小试管 , 10P 15’高压灭菌。 VP 试剂: 成份：甲液 :α-奈酚 6 g 乙醇 100ml 乙液:40%氢氧化钾 靛基质培基 : 成份：牛肉膏 0.6g, 胰蛋白胨 6g, 盐酸胱氨酸 (L- 半胱氨酸 )0.04g, 琼脂 0.6g,硫代硫酸钠： 0.01g 蒸溜水 200ml 制法： 将上述成份加热溶解 , 调 PH7.4, 分装小试管 , 15磅 15分钟高压灭菌。 硝酸盐培基 成份： 硝酸钾(KON3) 0.2g, 优质蛋白胨 2.0g, 蒸溜水 200ml 制法：将上述成份加热溶解 , 调 PH7.4, 分装小试管 , 10P 20’高压灭菌。 碱性蛋白胨水 成份：蛋白胨 10 g,氯化钠 2.5 g,H2O500ml 混合溶解 ,调节 PH8.4,高压 15分钟灭菌 血液保养液 成份：枸橼酸 0.47 g; 枸橼酸钠 1.33 g;葡萄糖 :1.5 克 蒸馏水 100ml 每 25ml 可使