医学检验-粪便标本处理.docxVIP

粪便标本 粪便标本中常见的病原菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 金黄色葡萄球菌 伤寒及其他沙门氏菌 厌氧链球菌种 志贺菌属 结核分枝杆菌 致病大肠埃希氏菌 产气荚膜杆菌 弧菌属菌种 艰辨梭菌 气单胞菌种 白色念珠菌 邻单胞菌 小肠结肠炎耶尔森凿 弯曲国 沙门-志贺氏菌：接种HE及麦康凯平板，35C、18?24小时后检查平板，有疑似菌落，接种双糖，细菌分纯后用细菌鉴定仪上 板鉴定后与沙门、志贺氏菌因子血清凝集 ，以确诊. 霍乱弧菌培养：取疑似患者粪便接种于碱性蛋白弥水中 ，进行增菌，同时划线接种于碱性琼脂平板 /双洗平板血琼脂平板，孵 TOC \o 1-5 \h \z 育.增菌培养孵育6小时后，取菌膜移种于上述平板，进行分离培养，并同时做涂片，行革兰染色和悬滴标本，检查形态和活动力.各 种分离平板在孵育 18-24小时。观察菌落，挑取可疑菌落，先与生理盐水混匀，观察有无自凝现象.再用O1群霍乱多价血清作玻 片凝集试验.如发现霍乱病人，立即向当地防疫部门提供及时准确的信息 . 致病大肠埃希氏菌培养：引起腹泻的大肠杆菌有四种 --ETEG EPEG EIEG EHECB液体状、脓血或糊状粪便或肛拭子划线 接种于麦康凯或伊红美兰及血琼脂平板上 ，35C孵育18-24小时，挑选乳糖发酵菌落 5个,移种于KIA和MIU孵育过夜，并同时进 行细菌分纯，用细菌鉴定仪上板鉴定并进行血清学分型 ^ 副溶血弧菌培养：取粪便接种于副溶血弧菌增菌液中 ，6-8小时后接种于TCBS^ SS琼脂平板上，35C孵育18-24小时后，观 察菌落，挑取TCBS上绿色微隆、浑浊、湿润菌落 ，SS上挑取无色透明、不易挑起菌落进行分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定 ^ 真菌培养：真菌性腹泻多继发于抗生素治疗后，常见于白色念珠菌、球拟酵母菌.将标本接种于含氯霉素的沙保氏琼脂及血 琼脂平板，置25-30 C孵育24-48小时,根据菌落形态及涂片革兰氏染色所见结果 ，决定鉴定方法. 菌群失调及菌交替症：根据临床提示粪便培养需选用数种培养基 ，包括强选择性和弱选择性肠道培养基、 需氧及厌氧血琼 脂平板、沙保氏琼脂等，按各类细菌分别进行培养鉴定，并观察其数量变化. 3、操作流程（沙门-志贺氏菌属检查） 粪便或肛拭子 分离培养 增菌培养 I,I I HE及麦康凯琼脂分离培养 血平板分离纯培养 血清学鉴定细菌鉴定药敏试验 血清学鉴定 细菌鉴定 药敏试验 报告 4、报告方式: 以分离目的菌种的结果而决定 ，如:目前常规以SS/HE和中国蓝或伊红美兰分离粪便中的致病菌 ，阳性者应报告“沙门菌或 志贺氏菌”，阴性应报告“未检出沙门菌属或志贺菌属” .其他培养结果报告方式与上述原则基本相同 . 5、注意事项 人类肠道中的细菌种类繁多，数量亦多，在健康人肠道内经常寄居的大量的细菌，一旦肠道发生病理改变时，就可 能侵入病变部位而引起疾病。 提高阳性检出率必须注意：标本要采集新鲜的、陈旧标本大大影响阳性检出率。 痢疾患者要采集大量脓血部位进行培养。 切勿粪尿混合否则也会影响阳性检测率。 穿刺液培养常见的病原菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 金黄色葡萄球菌 淋病奈瑟氏菌 A群链球菌 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 大肠埃希氏菌 草绿色链球菌 产气肠杆菌 肠球菌 伤寒及其他沙门氏菌 厌氧链球菌 肺炎克雷伯氏菌 结核分枝杆菌 产碱杆菌 产气荚膜芽胞杆菌 铜绿假单胞菌 放线菌 不动杆菌 念珠菌 梭杆菌 拟杆菌 当留取标本时，为防止穿刺液凝固，可在无菌容器内预先加入灭菌肝素，再注入各种穿刺液. 涂片检查：标本如为浆液，可经3000r/min离心，取沉淀涂片.如为脓液，可直接涂片，涂片固定后，做革兰氏染色和抗酸染色. 除常规一般培养外，应根据临床提示的要求增加真菌和结核培养 ，穿刺液含细胞数量较少，必须做增菌培养.如标本外观非 脓样,可加大接种量.平板经35C 24-48小时孵育后，如有细菌生长，按常规鉴定，无菌生长的平板还应继续孵育至 48小时.方可报 告阴性. 浆膜腔积液采集 穿刺液(胸水、腹水、关节液、鞘膜液) 涂片革兰氏染色初步报告结果血平板、麦康凯 涂片革兰氏染色 初步报告结果 血平板、麦康凯 巧克力平板 35度18-24h , 5%-10%CO2 挑取可疑菌落分离培养 ▼ 菌种鉴定，药敏试验 I 报告结果 4、 报告方式： 穿刺液中检出细菌均应报告鉴定结果及药敏试验 ^ 注意事项 穿刺液盛于含有抗凝剂的试管或小瓶中，充分混合后，立即送检或置 4度冰箱保存。 应根据临床要求选择相应的培养基。 对疑有淋病性关节炎患者之关节液，采集应即刻送检或床边培养为佳。 脑脊液标本 正常人体脑脊液是无菌的。当人体患有脑脊髓膜炎症时，在脑脊髓液中可以出现病原菌。常见的病原菌有细菌、真菌和结核 菌等，引起脑脊髓膜炎的微生物主要有