动物传染病学：实验二 动物感染试验.pptVIP

实验分组和卫生 小白鼠、蜡盘、剪刀、镊子等：2人/组。 清洗蜡盘、剪刀及镊子（小组），桌面、地面和小鼠尸体。 实验二 动物感染试验 一、实验动物抓取与固定 1. 小鼠 小白鼠的捉拿法 2. 豚鼠 3. 家兔 二、实验动物的注射 1. 小鼠 皮下注射(s.c)：颈背部、腋下、腿、侧腹。 肌肉注射(i.m)：股部肌肉。 腹腔注射(i.p)：下腹部腹中线两侧。 尾静脉注射：小鼠有上、左、右。 2. 家兔 兔的耳缘静脉注射法 三、实验动物的采血 1. 小鼠： 尾静脉：用于少量多次采血。 眶静脉丛（窦）：少量多次采血，小鼠0.2~0.3ml/次。 摘眼球：用于一次大量采血，可得到4~5％体重的血量。 2. 豚鼠 心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到5~10ml血量。 3. 家兔 耳缘静脉：可反复采血，每次5~10ml。 心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到80～100ml血量。 颈动脉采血：用于一次性采血，需要手术，可得血量80~100ml。 动物感染试验 一、实验目的 二、实验材料 三、实验方法 四、结果分析 一、实验目的 1.了解动物实验的基本技术和方法。 2. 掌握细菌学诊断常规方法。 二、实验动物和主要器材 1. 小白鼠 2. 细菌培养物、生理盐水、注射器 3.解剖盘、大头针、眼科剪、小镊子 4. 载玻片、革兰氏染色液、显微镜 5. 酒精灯、酒精棉 三、实验内容及步骤 1. 小白鼠的病理模型复制。 （1）皮下接种 （2）腹腔内接种：0.5 ml/只。 2. 小白鼠眼球采血处死、剖检及观察。 3. 细菌抹片的制备与镜检(油镜的使用和清洗)。 4. 细菌接种与分离。 （一）小白鼠剖检及观察 1. 观察小白鼠外观、眼球放血处死。 2. 用酒精棉擦小白鼠尸体并用大头针将其固定在腊盘。 3. 以无菌剪刀及镊子剥离胸腹部皮肤使其外翻。 4. 观察心、肺、肝和脾等脏器，破颅检查脑组织。 5. 清洗和擦拭解剖器械、腊盘。 空肠 1. 细菌抹片的制备 2. 革兰氏染色 ① 将载玻片置于玻片搁架上，加结晶紫染色 液，染色1分钟，倾去染色液，用自来水小心地冲洗。 ② 滴加碘液，染色1分钟，同上水洗。 ③ 滴加95%乙醇脱色10~30秒，立即水洗。 ④ 滴加复红，染色1分钟，水洗。 （二）细菌抹片的制备与镜检 （三）细菌接种与分离 需氧培养 直接涂片 染色镜检 传统方法或自动培养仪指示有菌生长 需氧培养及CO2培养 样品（无菌采集） 厌氧培养 增菌培养 分离培养 直接药敏试验 厌氧培养 挑选菌落 纯培养 直接涂片 染色镜检 血清学试验 鉴定报告 临床样品的细菌学检验程序 直接涂片 染色镜检 药敏试验 生化反应 四、结果与分析 1. 记录小白鼠的病理变化、抹片镜检的细菌形态； 2. 如何鉴定感染小鼠的细菌？