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2．制备色谱用样品的制备与纯化 2.1 提取 ? 水层 石油醚液 用氯仿或乙醚萃取 水层 氯仿或乙醚液 乙酸乙酯萃取 ? ? 水层 乙酸乙酯液 正丁醇萃取 ? ? 水层 正丁醇液 中药粉末 用乙醇提取，滤液，回收乙 醇，用水混悬，用石油醚萃取 [乙醇浓度的影响 95%乙醇可提取生物碱、挥发油、树脂和叶绿素； 60—70%的乙醇可提取苷类成分； 40—50%的乙醇可提取强心苷和鞣质； 20—30%的乙醇可提取蒽醌及其苷类成分；] [水对植物细胞的穿透力最强，因此用有机溶剂进行提取时一般可以先以水浸润干燥后再提取。] 渗漉与加压固液提取 渗漉是不加热的连续抽提，缺点是溶剂用量大，回收费时，优点是不受热，溶剂可以套用。一般到无色或渗漉液体积相当于药材量的10倍时可停止渗漉。 加压固液提取 是将干燥的中药粉末装入柱中，用泵加压使提取溶剂通过柱床，Dionex公司ASE200型提取器，每次提取20min即可，提取温度也可调整到200℃其规格有11、22、33ml的。 一般提取分离情况有2种，即已知化学结构类型的成分和一无所知的成分。对于已知结构类型的成分可借助文献等设计分离方法。而对于无任何信息的中药，关键是先有疗效，然后跟踪分离。先做化学成分预试，然后设计提取分离方法。 1．各种试剂对化学成分的溶解度都不是绝对的，有相互夹带，需注意； 2．有机溶剂的渗透性差，所以用有机溶剂提取前可先将中药用水润透，干燥后再用有机溶剂提取，效果会更好； 3．中药水提液如处理不及时，因其中含糖、蛋白质等营养物质易发霉，为防止发霉，可加入少量甲苯、甲醛或氯仿等做防腐剂； 4．用水渗漉时，有时室温较高，在渗漉过程中，中药会发酵，为防止发酵可用氯仿饱和的水进行渗漉； 提取过程中的几点经验及注意 5．水提取和减压浓缩时产生大量泡沫，给提取和浓缩造成困难，通常可在蒸馏瓶上装一防泡球加以克服；如图2-2或改用旋转蒸发仪，薄膜蒸发，喷雾干燥，冷冻干燥等。 实验室可加入消泡剂，如吐温、司盘、豆油；丁醇、戊醇等。 6．提取苷类中药时为防止水解，可先将中药粉末加醇煮沸片刻，以杀酶保苷，在提取氰苷和蒽醌苷时尤需注意。也可蒸30min或50min，根据药材质地而定。或直接用醇等有机溶剂提取；（或用硫酸铵等无机盐盐析使酶沉淀除去，鲜中药低温烘干60℃以下，将生药粉末在低温下与等量的硫酸铵调成糊状，装入布袋，压汁，药渣用有机溶剂提取原生苷。） 7．提取次生苷时则利用其酶的活性，自身酶水解。（中药粉末加等量水拌匀湿润后，在30~40℃保持6~12h以上，进行发酵酶解，然后在正常提取分离（如狄戈辛和西地兰）。 2.3 溶剂分配 溶剂分配主要是根据待分离物质在不相混溶的两相中分配系数的不同得以分离。是一种简便快捷的方法。在得到提取物之后，接着用溶剂分配可除去大量外来杂质，特别是在进行生物活性跟踪分离时可快速得到富含所需成分的部分。如用于从植物中寻找抗肿瘤成分，抗HIV的活性成分，生物碱成分，对紫杉醇的初步纯化等。 在从植物中寻找新的具有抑制HIV活性的化合物时，一以1：1的二氯甲烷与甲醇及甲醇相继提取植物材料时，