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- 2020-11-07 发布于天津
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纸层析法分离氨基酸 实验目的 1 、掌握分配层析的原理,学习氨基酸纸层析法的操 作技术 ( 包括点样、平衡、展层、显色、鉴定及定 量 ) 。 2 、学习未知样品的氨基酸成分 ( 水解、层析及鉴定 ) 分 析的方法。 实验原理 1 、纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤 维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有 机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时,物质在两 相间不断分配而得到分离。 2 、溶质在滤纸上的移动速度用比移值 Rf 值表示: 3 、 Rf = 原点到层析斑点中心的距离 / 原点到溶剂前沿的距 离 4 、在一定的条件下某种物质的 Rf 值是常数。 Rf 值的大 小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量 和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨 基酸。 实验材料与试剂 实验试剂 1 、氨基酸标准液 (1mg/mL) 2 、 80% 3 、 0.1% 4 、氨基酸混合液 ( 每种氨基酸 500mg/mL) 5 、正丁醇 1 、新华滤纸 2 3 、电热鼓风干燥箱 4 5 、毛细管 6 、针、线、尺。 7 ( 高约 430mm, 直径约 290mm ,具磨口塞 ) 实验操作 标准氨基酸纸上层析 单向上行 层析 氨基酸 Rf 值的测定 A 、 滤纸 :选用国产新华 1 号滤纸, 6cm × 7cm 。在距滤纸 2cm 处划线,用铅笔在线上标上四个点作为点样
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