应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样品浓度.docxVIP

应用EXCELS制ELISA标准曲线及计算样品浓度 在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的 OD值。 其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的 OD直及其相对应的浓度，以 OD直为横坐标，浓度 为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的 OD直以X值代入，便可求出 Y值，即样本浓度。 卜面我们就一步步来实现这个目标: 1、首先，将数据整理好输入Excel ,分别为经酶标仪读出标准品的 OD值及其 对应的浓度值。 :里|文件但）编辑⑥ 视图⑦ 插入d）格式⑥ 工具廷）数据四 窗口① 帮目 -J H。1 1 cJ X 1 1 A 也 / J 1 勺▼，二 乏2 “L8 J5 ? r a n B C D E F G H I 1 2 3 标准品OD值 2. 822 L855 1. 204 CL 751 0. 459 0, 307 0,212 0.152 4 标准品浓度 1000 500 250 125 62.5 31,25 15. 625 0 5 _6_ 2、拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图”， 并选择子图表类型的“散点图”（第一个没有连线的），如下图所示。 3、点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不 用更改，如果是纵向列表就改选“列”。 在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时,因样本 OD值是已知的，因此我 们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标 X值为OD值，纵坐标丫为标准品浓度，这正是我 们想要的。 有时需要我们手动选择 X值，这时可以点击“系列”来更改，如下图 A B C D E F G H I 1 2 3 标准品oiXl L2..822 [855 1. 204 6. 751 0.459 6. 307 212 6. 152： 4 标准品流度 1000 500 250 一125 62.5 31. 25 15. 625 0 出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整 X或丫。 文件⑥数据区域123标准占4标准占56 ,7 文件⑥ 数据区域 1 2 3 标准占 4 标准占 5 6 , 7 8 9 10 .11.. 12 13 14 15 16 17 系列⑤ 添加镣）册瓣鱼） 结果如下图: B3 =Sh?etl!$E$4:Sl$4 1^1 职消 】R上一步麒］［下一步如 ＞］［完成 昱. 152 a 如果要对横坐标和纵坐标进行调换，我们可以就点击 X值和Y值文本框右边的小图标, 5、调好之后，然后点击“下一步”出现图标选项界面，如下图 其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上），然后单击右键，点击“添加趋势线”。弹出 趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图： 8、在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或 接近直线，我们就选择“线性”，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该直线的方程就是 y=ax +b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的， 也就是说不是一条完全的直线, 这时我们可以选择“多项式”，多项式后面还有“阶数”的选择，也就是说求出来的方程是几次方，我们 一般选2阶，即出来的方程为 y=ax2+bx+c.选择完毕后，弹出以下窗口。 ：i￡|文件?）编辑② 视图⑦ 插入d）格式? 工具（I）图表? 窗口址）帮且 9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来，以 根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后出现下图的样子即线由很多店标识 出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选 择显示公式，显示 R方，即相关系数，这时公式与 R方值便都显示出来了。 我们将样本的OD值作为X代入上述方程，求出来的便为浓度值了。 一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到 0.95以上，本例中为0.9999 ,非常不错的曲线，这样就保证了 由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。 上海研谨生物公司 ELISA 价格公道合理，实验过程免费提供技术支持， 有质量问题可 包退包换，如您采购的试剂盒量大我们会以 ELISA批发价格让利给您，促销期间还有精美 礼品赠送，感谢您选择本公司的 ELISA试剂盒产品。