(完整word版)qPCR的原理.docxVIP

原理 1） PCR： Polymerase chain reaction. 是体外模 生物的 DNA 复制。需 要 DNA 聚合 ，DNA 模板，两端引物，脱氧核苷酸 dNTPs( dATP, ACTP, dGTP, dTTP),以及适当的 冲体系。 PCR 物的增 形式 ２ N (如果各种 和外部所加条件均理想化， N 是循 数 )。 中， 增效率不 100％。 Real time PCR 是定量 PCR 的一种，当然是在 PCR 的基 上 展出来的。（普通）PCR 包含很多因素， 属性，如： ，温度，循 数，程序，PCR 物（ 增子， amplicon）的量， 增曲 （ 增子累 曲 ）， 率， 增子 度。 一般来 ，人 关心的是 增子的量。而 real time PCR 主要利用的是 增曲 amplification curve）, 循 数； 增子 度， 增效率， 增子多少，也加以考 。 普通 PCR 是在 增完以后，（无 多少个循 ）， 行 泳，染色。 于判 断目的 DNA 有没有，是出色的。但 于 目的 DNA 有多少分子（初始的 候）， 勉 其 。因 PCR 的理想和 仍相差一段距离。理 界普遍 ， PCR 的起始若干循 内，由于原料， 的充足，抑制子（抑制 PCR 的因素，如 dNTPs 分解 生焦磷酸）的量少， PCR 可以是理想的——即每