原创力文档- 79
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- 2020-11-11 发布于天津
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质粒的提取碱裂解法实验原理碱裂解法提取质粒利用的是共价闭合环状质粒与线状的染色体片段在拓扑学上的差异来分离它们在值介于这个狭窄的范围内线状的双螺旋结构解开变性在这样的条件下共价闭环质粒的氢键虽然断裂但两条互补链彼此依然相互盘绕而紧密地结合在一起当加入的醋酸钾高盐缓冲液使降低后共价闭合环状的质粒的两条互补链迅速而准确地复性而线状的染色体的两条互补链彼此已完全分开不能迅速而准确地复性它们缠绕形成网状结构通过离心染色体与不稳定的大分子蛋白质复合物等一起沉淀下来而质粒却留在上清液中提取步骤吸取菌液于离心
质粒DNA的提取（碱裂解法）
实验原理：
碱裂解法提取质粒利用的是共价闭合环状质粒 DNA与线
状的染色体DNA片段在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内，线状的 DNA双螺旋结
构解开变性，在这样的条件下，共价闭环质粒 DNA的氢键虽
然断裂，但两条互补链彼此依然相互盘绕而紧密地结合在一 起。当加入pH4.8的醋酸钾高盐缓冲液使 pH降低后，共价 闭合环状的质粒DNA的两条互补链迅速而准确地复性，而线 状的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，不能迅速而 准确地复性，它们缠绕形成网状结构。 通过离心，染色体DNA 与不稳定的大分子 RNA蛋白质-SD
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