内标法-标准曲线.docVIP

配置不同浓度配比的苯甲醇和苯甲醛标准样品，如表2-4， 表2-4 标准液的配制 Tab.2-4 Preparation of standard solution 标准液编号 1 2 3 4 5 6 苯甲醇(ul) 0 20 40 60 80 100 苯甲醛(ul) 98 78.5 58.88 39.25 19.63 0 十二烷(ul) 50 50 50 50 50 50 按照内标法原理，做出苯甲醇和苯甲醛的标准曲线，其原理如下： 设在 V mL 样品中含有 Ci mol·mL-1待测样i，加入CS mol·mL-1内标物S，混合均匀后于色谱进样，得到组分i及内标物S的峰面积分别为Ai及AS。由于峰面积正比于通过检测器的物质的量，所以有： Ci = fi Ai，CS =fS AS，式中 fi、fs 分别为组分i和内标S的校正因子。 两式相除，得：Ci /CS =fi Ai / fS AS= fi / fS?Ai /AS (1) 由于在实际工作中一般采用相对校正因子（某物i与所选定的基准物质S的绝对定量校正因子之比）即：f = fi / fS ， (1)式可简化为Ci /CS = f ? Ai /AS (2) 根据（2）式，在测量过程中，分别称取准确质量的样品，混合均匀后进样，记录其相应的峰面积，计算可得相对质量校正因子。由于内标法是一种相对测量方法，因此，对进样量要求不太严格，操作条件稍有变化或是仪器的误差对结果均不会产生较大的影响。在用内标法做色谱定量分析时，先配制一定配比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做浓度比与面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。 图2-3 反应物苯甲醇的标准曲线 Fig.2-3 The standard curve of the reactant benzene alcohol 图2-4 产物苯甲醛的标准曲线 Fig.2-4 The standard curve of the product benzaldehyde 图2-3为反应物苯甲醇的标准曲线及线性回归方程，图2-4产物苯甲醛的标准曲线及线性回归方程，横坐标表示待测物与内标物十二烷的物质的量浓度之比，纵坐标表示待测物与内标物十二烷的峰面积之比，得出的标准曲线的线性相关度R2均满足实验要求。由此得出， 苯甲醇转化率的标准曲线：y=0.5979x+0.0058 R2=0.9986 苯甲醛产率的标准曲线： y=0.5429x+0.0243 R2=0.9977 通过实验得到待测物和内标物的峰面积，将二者做比，然后代入线性相关公式，可分别得出待测物在混合液中的浓度，进而利用公式 C %=(N1-N2)/N1×100% 式中 C ?苯甲醇转化率 N1—反应前苯甲醇的初始物质的量 N2—反应后苯甲醇的剩余物质的量 Y %=N3/N1×100% 式中 Y —苯甲醛产率 N1—反应前苯甲醇的物质的量 N3—反应结束后苯甲醛的物质的量 即可得到反应后的混合液中苯甲醇的转化率和苯甲醛的产率。