生物化学技术基本原理与应用.ppt

生物化学技术基本原理和应用;; 第一编 概 述;第一章 生命大分子物质的制备;第一节 材料的选择与处理;一、材料的选择 ;二、材料的处理 ;;;第二节 确定测定方法;一、目的和要求;二、常用的测定方法;;;;;;;;;第三节 细胞的破碎 ;1.物理方法;2.化学处理;3.生物方法 ;第四节 抽提 ;一、抽提的含义 ;二.抽提有效成分的影响因子;;;; 6.氧化 一般蛋白质或酶含有必需集团巯基,若抽提液 中存在氧化剂或氧分子时,会使巯基形成分子内或分子间二硫键,导致蛋白质变性。 为此,常加入2-巯基乙醇、半胱氨酸还原剂。 植物组织和微生物细胞中含酚类物质,在多酚氧化酶作用下,可变为有色的醌类物质。 加入苯基硫脲,可抑制这一反应。 ;;;第五节 浓缩 ;;;;;;;;;第六节 纯化方案的设计与评价;一. 纯化方案的设计 纯化的总原则:考虑抽提液中有效成分与杂质的理化性质差异,几种方法组成一个科学合理的纯化方案 切忌:一种方法重复使用 ;;;第二章 沉淀法 ;第一节 基本原理与沉淀类型 ;一、基本原理;二、制备蛋白质;1. 盐析法 ;;;;;;;;;2. 有机溶剂沉淀法;3. 蛋白质沉淀法;4. 聚乙二醇沉淀法;5. 选择性沉淀法;6.结晶沉淀法;三、制备核酸;1.DNA/RNP复合物的解聚;2.多糖等杂质的消除;;;3.核酸沉淀;第二节

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