我的 过硅胶柱的经验.docVIP

一、装柱?装柱子(添硅胶)时,常用得有两种方法:即湿法装柱与干法装柱,二者各有优劣。??不论干法还就是湿法,硅胶(称为固定相更为广义)得上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)得高度一般为15cm左右(长度没有绝对之说,根据自身情况而定,制备得大柱可以长达一米),太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。　??湿法装柱就是先把硅胶用适当得溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压(土方法可以用养鱼得氧气泵加压或就是用氮气,当然不加压也可以)用淋洗剂走柱子＂,本法最大得优点就是一般柱子装得比较结实,没有气泡。 (我一般都用湿法装柱)?干法装柱则就是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧(湿法也要敲得,效果好点),至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装得很结实(一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了)。接着就是用淋洗剂＂走柱子,一般淋洗剂就是采用TLC分析得到得展开剂得比例再稀释一倍后得溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但最大得缺陷在于＂走柱子＂时,由于溶剂与硅胶之间得吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到)(梯度洗脱时,湿法装柱也会出现该情况,比较不好处理,可以缓慢改变溶剂,且置于通风处),容易产生气泡,这一点在使用低沸点得淋洗剂时如乙醚(用乙醚最最明显),二氯甲烷更为明显。虽然产生