细胞生物学实验考考试样题及实验思考题答案.pdfVIP

细胞生物学实验考试样题 一、填空题 （2 分/每空，共 30 分） 1、洗液由 重铬酸钾、 浓硫酸和蒸馏水组成。 2 、1640 培养基包括 RPMI1640 培养液 、谷氨酰胺 、双抗 、小牛血清。 3 、鉴别活细胞的染液是 0.4%台盼蓝溶液 ;鉴别细胞核的染液是 甲基绿-派洛宁染液 鉴别线 粒体的染液 中性红-詹纳斯绿染液 。 4 、细胞核分离的基本步骤是 组织匀浆 、离心、纯化 、鉴定 。 5 、细胞骨架中使蛋白质被保存的染料是 1%Triton-100 。 二、简答题 （5+5+10 共 20 分） 1.线粒体在分离提取过程中，为什么要在 0~4℃中进行？ 答：①为了保持组分的生理活性; ②防止线粒体中的酶被破坏，避免酶失活 2.什么我们在检测细胞渗透性时要用一定浓度的试剂？ 答：①确保实验是在等渗条件下进行 ②防止物质的进出 ③同时避免由于渗透压不同而影响实验结果。 3.细胞的计数步骤和方法。 答：加等体积的染液与细胞悬液混合～把悬液滴在计数板上～底倍镜下观察，活细胞 无色，死 细胞为蓝色，找计数方格计四个方格的细胞总数。（压到大格线者“计左不计右， 计上不计下”）计算。 Ⅰ：每毫升原液细胞数=4 个大格细胞总数/4*100*稀释倍数 Ⅱ：细胞存活率(%)=(细胞总数-死细胞数)/细胞总数。 细胞生物学实验思考题答案 实验一 利用各种显微镜观察细胞形态、结构 1、简述显微镜的主要结构和操作要领。 普通生物显微镜由 3 部分构成： ① 照明系统：包括光源和聚光器。 ② 光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。 ③机械装置：用于固定材料和观察方便，包括镜台(载物台) 、调节器和物镜转换器(旋转器等 使用（一）、观察前准备 检查：底座右侧的光源亮度旋钮是否在“1”位置，即顺时针选到最底位。 开机：①.打开后座主电源开关——绿色按钮 ②打开后座 CCD 电源开关——红色按钮 白平衡调整：不放切片，在 10 倍物镜下将电源调整到最亮，然后按底座右方的白平衡按 钮（红色）3 －5 秒之后将光源亮度调回到适中状态。 （二）、观察操作 2 放上切片，将光源调到自己习惯的亮度。 视度补偿：调节目镜双筒找到自己的瞳距，此时两眼镜下的图象重合在一起，横拉板上 的数字（例如：64）就是自己的瞳距，然后将两只目镜外侧的刻度线调到瞳距的数字的 位置。 调焦：将绿色光标移至视野中央，开始观察，如需提问，按呼叫按钮 （三）、下课时的操作 ①.将光源亮度调到最低“1”刻度。 ②.关掉红色 CCD 电源开关，再关绿色主电源开关。 ③.套上显微镜套。 ④.耳机及凳放整齐。 2 、分析在使用低倍镜、高倍镜和油镜时，对光亮度的要求。 由于从低倍镜到高倍镜的时候视野变暗，物像变大，细胞数目变少，所以光亮度应该调高，但 最主要的还是应以自己的视觉舒适为主。 3 、分析聚光镜在成像质量中的作用。 聚光镜是在照明光路中的重要组件，用于集中从光源来的光线，是被观察的标本得要明亮和均 匀的照明，正确使用聚光镜系统对于发挥显微镜的分辨率和增强像的反差有很大的作用。 实验二 显微摄影 1.、要想得到一张完美的显微摄影照片，应注意哪些方面的问题，主要关键是什么？ 要获得一张好的显微摄影照片，必须注意满足以下几个条件：1 制作清晰的标本片，其中组织 切片应厚薄适度，染色片不应有多余的染料等。2 选择性能优良干净的载玻片和盖玻片。3 使用高 性能的物镜（最好用复消色差的平场物镜）和聚光器。4 采用 Kohler 照明法。5 选择好合适的拍 摄胶片。⑥拍摄时应准确地聚焦和选择合理的曝光时间。⑦正确的冲印方法。关键点：为求得高 分辨率的显微影像，须选用复