环境卫生学监测及标本采集方法ppt参考课件.pptVIP

3、物体表面的采样 采样时间：根据采样目的选择采样时间，如进行常规物体表面监测，选择消毒处理后4小时内进行采样，若是暴发流行时的环境微生物学监测则尽可能对未处理的现场进行采样。 采样面积：常规监测时被采面积＜100cm2，取全部表面；≥100cm2，取 100cm2。暴发流行时采样不受此限制。 所用材料： * （1）棉拭子采样法 对于平面物体，用5cm×5cm大小的标准灭菌规格版，放在被检物体表面，用用浸湿灭菌生理盐水的棉拭子在规格版内横竖往返均匀涂抹各5次，并随之转动棉拭子，连续采样1－4个规格板面积。用无菌剪刀剪去手接触部分，将棉拭子装入放有10ml灭菌生理盐水试管中。 对于门把手，金属，玻璃等曲面小型物体则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样，敷料，卫生纸等一次性物品采样时，用无菌法取样品5g，放入装有10ml灭菌生理盐水试管中。 * * * * 检验方法： 1）将采样管敲打80次（或1分钟） 2）用灭菌吸管吸取0.2ml于营养琼脂平皿中，然后用无菌L棒涂在整个平皿表面，置36°C温箱24小时观察结果。 * 计算公式： 菌落数/ C㎡＝ 平均菌落数×稀释倍数 采样面积×0.2 * 4、透析液微生物监测 检测方法：用无菌吸管吸取透析液进出水各2～3ml，放入无菌试管，检测时可视透析液污染程度分别取原液或10倍稀释液0.5ml放入2个灭菌平皿内，45 ℃ ～48 ℃的营养琼脂15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，将平板置37 ℃培养24小时，观察结果。 细菌总数/ml＝2个平板上的菌落总数×稀释倍数 评价标准：进水≤200cfu/ml 出水≤2000cfu/ml * * * 5、使用中消毒剂监测 为监测消毒溶液在连续使用过程中的污染菌量，应定期到各科室采样做生物学测定。 采样方法：用无菌吸管吸取消毒液1ml加至装有9ml含有相应中和剂的营养肉汤内，以中和消毒药物的残效作用，中和时间10分钟至1小时。 * 常用消毒剂中和剂及其浓度表 消毒剂 中和剂及其浓度 甲醛 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 氨水 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%） 戊二醛 甘氨酸（1.0%）；赖氨酸 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%） 过氧乙酸 硫代硫酸钠（0.1%～0.5%） 含氯消毒剂类 硫代硫酸钠（0.1%～1.0%） 季铵盐类 吐温－80（0.5%～3.0%） 卵磷脂（0.3%） 硫代硫酸钠（0.1%～0.5%） 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 碘（溴）制剂 亚硫酸钠（0.1%～0.5%）；卵磷脂（0.1%～0.3%） 硫代硫酸钠（0.1%）；半胱氨脂（0.1%） 酚类 吐温－80（1%～10%）；卵磷脂（0.1%～0.3%） 氯已定 卵磷脂（1.0%～2.0%） 汞制剂 硫代硫酸钠；亚硫酸钠；半胱氨脂（0.1%） 醇类 吐温－80 酸类 碱类 碱类 酸类 * 用无菌吸管吸取中和采样液0.2ml，转种于营养琼脂平板中，用L棒涂抹于普通琼脂平板，置36 ℃温箱培养48小时观察结果。 菌落数/ml＝ 平均菌落数×稀释倍数 0.2 * 结果判断 使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml，不得检出致病微生物。 无菌器材保存液必须无菌生长。 * 6、压力蒸汽灭菌效果监测 指示菌：嗜热脂肪杆菌芽胞（产品应根据厂家说明书在有效期内使用） 方法：灭菌完毕，取出自含式生物指示物，至少冷却10分钟以上，将安瓿折断或挤破，让管内溴甲酚紫蛋白胨水培养基与嗜热脂肪杆菌芽胞菌片融为一体，同时将一未经灭菌的生物指示物一同培养，56 ℃ 48小时后进行灭菌效果判定。 * 效果判定 阳性对照 阴性对照 试验管 结果 黄 紫 紫 灭菌认可 黄 紫 黄 灭菌失败 * 7、内镜消毒灭菌效果监测 采样时间：消毒、灭菌后，使用前。 采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检。 检测方法：将送检液充分震荡，取0.5ml，加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45℃左右营养琼脂15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35℃培养48小时后计数。 细菌菌落数/件＝2个平皿菌落数平均值×20 * * * 8、医疗用品的监测 包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理