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(一) 中药药理学实验是中药药理学学习的重要组成部分,它的目的在于通过实验,不仅仅是验证药理学中的重要基本理论,牢固地掌握药理学的基本概念,更重要的是培养智能,即了解获得药理学知识的科学途径。 使学生掌握进行中药药理学实验的基本方法和技能,初步具备客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。同时,通过实验培养学生对科学工作的严肃态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风。 中药药理学实验的基本程序大体分为选题、设计、实验、资料整理与总结五步。实验设计是中心环节,是制定实践选题目标,它关系到能否按选题愿望取得预期的结果。 三大原则 随机 对照 原则:“齐同对比” 重复 重复是实验设计的首要原则,可靠的实验结果,应能在相同的实验条件下重复出来,即重现性。 空白对照组 阴性对照组 阳性对照组 组间对照组 绝对随机 均衡随机 实验设计程序中应考虑的四个问题 实验设计程序中应考虑的四个问题 选择适当的实验动物 确定实验方法与观察指标 重视预备实验 明确实验目的 问题: 请选择一味能治疗消渴症的中药,并讨论其对消渴症模型的影响。以此设计一项实验。 实验预前准备 中药 葛根 雄性wistar大鼠 实验动物的确定 药效筛选预实验 方法和指标的确定 给药剂量的确定 实验目的 葛根对消渴症模型的影响 大鼠腹腔注射链脲佐菌素造模 动物分组 血糖 一般指标 统计方法的确定 阳性药 一、实验动物的分类 (一)按遗传学控制分类 近交系 突变系 F1杂种 采用兄妹交配或亲子交配连续繁殖20代以上培育出的纯品系动物。 封闭群动物 一般是具有遗传缺陷的突变系动物。通过自然突变和人工定向突变培育而成。如肿瘤鼠,白血病鼠,贫血鼠,应用于免疫试验的裸鼠(无胸腺)。 两种纯品系动物交配而生出的第一代子代动物。特点就是遗传素质明确,生命力强,体质强壮。 用同一血缘品系群内的动物五年以上不引入新血缘品种混杂,随意繁殖称为封闭群主要特点就是抗病能力强。 (二)按微生物学控制方法分类 无菌动物 机体内均无任何寄生虫的动物 悉生动物 无菌动物,人为将指定的微生物投入其体内,因此体内带有已知微生物,在隔离器类饲养。 SPF动物 无特殊病原体动物。无传染病的健康实验动物。 清洁级普通动物 最低限度疾病动物。来自SPF动物,饲养在普通设施中。 (三)我国实际情况分类 清洁动物 SPF动物 无菌(GF)动物和悉生动物(GN) 普通动物 一级动物 二级动物 四级动物 三级动物 二 、常用实验动物的捉持给药标记 (1)大鼠 无胆囊,不呕吐。不能用于呕吐药物的实验 捉拿方法:以右手抓住尾部,左手戴手套防护(有经验者也可不戴),抓紧两耳和头颈部的皮肤,并将鼠固定在左中,右手即可进行操作。 常用的品种为Wistar大鼠和SD大鼠 (2)小鼠 常用品种为Swiss小鼠和昆明系小鼠 捉拿方法:用右手轻轻抓住尾,放在粗糙面上,轻向后拉,以左手拇指和食指夹住其两耳及头部皮肤,用无名指和小指压住鼠尾将小白鼠完全固定于手中。 (3)豚鼠 对组织胺敏感,常作为平喘药和抗组织胺药品研究。易过敏,常用于药物过敏试验。对结核杆菌极为敏感,用于结核病的研究。体内不能合成维生素C,是目前唯一用于试验性坏血病的动物。 一般实验是选用非纯种短毛豚鼠。 (4)家兔 我国科研教学常用中国本兔,青紫蓝兔,大耳白兔三种。 家兔耳大,血管清晰,便于注射和取血。兔耳动脉在耳中间行走,耳缘为静脉。见家兔的眼球甚大,便于手术操作和观察。因此是眼科研究中最常用的动物。家兔体温变化十分灵敏,发热反应典型、恒定。对许多病毒和致病菌非常敏感,可用于感染模型、过敏和免疫细菌学的研究。 (5)犬 属哺乳纲,食肉目,犬科。寿命10-20年。狗胰腺小,且易分离。具有发达的血液系统和神经系统以及基本上和人相似的消化过程,因而在进行血液循环、消化和神经活动等研究工作更为常用。在长期毒性试验用狗。狗有五种血型,即A、B、C、D、E型。对A型血进行交叉输血。 比格犬 常用实验动物的捉拿,标记,给药方法 大鼠小鼠的常用给药剂量 动物 灌胃给药 腹腔注射 皮下注射 静脉注射 小鼠 0.2-0.3ml/10g体重 0.1-0.2ml/10g体重 0.1-0.2ml/10g体重 0.1-0.2ml/10g体重 大鼠 1-2ml/100体重 0.5-1ml/100g体重 0.3-0.5ml/100g体重 0.3-0.5ml/100g体重 已知某种动物的使用剂量 例:已知家兔2kg,用药50mg/kg,求算家犬5kg体重用药量。 15.7mg/kg为人的估算剂量,考虑用药安全取其1/5-1/3。即3-5mg/kg为初剂量。药理实验概括为:人体志愿者的初试剂量为犬最大有效量的1/10。 计算由家犬过度到人的估计有效量,已知1
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