神经生物学 海南会议报告.pptVIP

* 半导体荧光量子点载体投递siRNA抑制BACE1基因表达的研究 研究目的与意义 实验方法 结果与讨论 结论 β-amyloid (Aβ) 聚集是阿尔茨海默病的主要致病机制，siRNA可抑制β-分泌酶(BACE1)的表达，降低Aβ的合成。本课题以半导体荧光量子点(Quantum Dot, QD)作为siRNA载体，提高siRNA对神经细胞的转染率，下调BACE1的表达和Aβ的产生，探讨多功能量子点(QD-siRNA)治疗阿尔茨海默病的作用和机制。 ◆ QD的荧光谱峰覆盖可见光至近红外光区，适用于活体动物 深部组织的荧光成像。 ◆ QD的荧光性质稳定，抗光漂白作用强，可实现长时间体内纳 米药物的连续示踪观察。 ◆ QD直径小穿透力强，能穿透血脑屏障和神经细胞膜，而且低 毒或无毒不会引起大脑排斥反应。 ◆ QD经过表面修饰可偶联生物大分子（siRNA、抗体、多肽 等），可特异性或靶向性的将药物运送到大脑的特定部位。 实验方法 1. 制备和表征量子点(CdSe/ZnS)QD 2. DSPE-PEG 2000 amine修饰量子点(PEG-QD) 3. 合成靶向BACE1的siRNA，FAM荧光标记siRNA 4. 凝胶电泳检测PEG-QD/siRNA复合体 5. 流式细胞仪(FACS)检测细胞转染效率 6. 激光共聚焦显微镜（LSM）实时动态检测转染过程 7. 透射电镜（TEM）观察转染细胞的超微结构改变 8. Western blot检测Aβ蛋白表达变化 结果与讨论1. QD和QD-PEG表征 QD粒径为5nm，发射峰为605nm。 QD-PEG粒径为84.2nm，发射峰红移到610nm。 2. QD-PEG负载siRNA实验 3.流式细胞仪检测QD-PEG/siRNAs转染SK-N SH细胞 4. 激光共聚焦显微镜实时荧光成像 5. 细胞超微结构的变化 *