JMP确定性筛选实验设计(DSD)在生物制药工艺特性研究中的应用[借鉴].pdfVIP

JMP 确定性筛选实验设计在生物制药工艺特性研究中的应用 生物技术是 21 世纪的战略新兴行业，大力发展以生物技术为核心的生物制药 行业不仅有利于促进创新型经济转型，更是推进健康中国建设，提高人民健康水平 的必由之路。近年来，随着国家药品审评审批制度的改革和完善，新药获批的数量 增多，速度加快，也给生物制药企业带来新的挑战，即如何迅速将复杂的生物制药 生产工艺从小试放大到生产，建立可靠稳定的生产控制策略，持续生产出安全有效 的药品。 面对这一难题，国内外大型制药企业普遍依据 ICH 相关指导原则，以质量源 于设计（ Quality by Design, QbD）的核心理念，通过广泛使用实验设计（ Design of Experiment, DOE），解决生物药物生产工艺中工艺参数多，交互作用复杂的难 题。在小规模详尽 DOE 实验的基础上，建立生产工艺参数与质量属性的关联关 系，充分理解生产工艺的特性，从而有效地保证大规模生产的顺利实施详见图 1。 图 1.依据 ICH 指导原则进行药品研发和生产的流程图 使用 DOE 方法可以用较少的实验，研究多个参数的关系。传统 DOE 实施方 法首先对大量参数进行分辨率较低的筛选实验设计，根据实验结果还可能需要第二 轮的扩增设计或响应曲面实验设计。生物药生产工艺参数多，常包含需要通过响应 曲面设计才能分辨清楚的高阶效应，此外，还会面临实验材料成本和时间紧张的压 力。这些实际困难决定了使用传统的 DOE 实验设计方法进行生物药物的研发具有 很大的挑战。而 JMP 软件所特有的确定性筛选实验设计（ Definitive Screening Design, DSD）具备实验次数少、分辨率高、节省时间等优点，为解决这一问题提 供了极大的便利。下面通过具体实例进行说明。 单克隆抗体的生产过程包括上游细胞培养、下游纯化和产品灌装 3 个部分。阳 离子交换层析是下游纯化生产中精细纯化的重要步骤，通过阳离子交换层析可有效 去除聚合体、电荷变异体、宿主细胞蛋白残留和外源性 DNA 残留等杂质，这些杂 质均为关键质量属性（ Critical Quality Attribute, CQA ）。通过实验设计方法，研究 阳离子交换层析工艺参数对 CQA 的影响关系，制定合适的控制策略。阳离子交换 层析考察的响应指标见表 1。 表 1.阳离子交换层析考察的响应指标 响应名称 单位 目标 目标范围 收率 % 最大化 ≥60 SEC-HPLC 纯度 % 最大化 ≥97 宿主细胞蛋白残留 ppm 最小化 ≤200 外源性 DNA 残留 ppb 最小化 ≤100 CEX-HPLC 纯度 % 最大化 ≥65 阳离子交换层析工艺过程包括近 20 项工艺参数，根据其他项目的知识和经 验，评选层析流速、载量等可能对纯化结果有影响的 8 个工艺参数进一步实验考 察。通过 JMP 软件 DSD 实验设计制定研究方案。所有工艺参数均为连续性变量， 不需要划分区组， JMP 软件默认生成一组包含 21 个实验运行的方案。研发人员又 增加了 3 个条件下的各