温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响[汇编].pdfVIP

（一）、温度、PH 对酶活性的影响 一、实验目的 了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适PH 及掌握一种检测最适PH 的方法。 二、实验原理 三、实验步骤 1、温度对酶活性的影响 取3 支试管，编号后按下表加入试剂 试管编号 试剂 1 2 3 0.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5 稀释唾液/ml 1 1 无 煮沸过的稀释唾液/ml 无 无 1 摇匀后，将1、3 号两试管放入37 摄氏度恒温水浴中，2 号试管放入冰水中。10min 后取出，将2 号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2 、3 号试管内淀粉被 唾液淀粉酶水解的程度。将2 号试管剩下的一半溶液放入37 摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。 注意事项： 1、 唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水， 0.5~1min 后，使其流入量筒，并稀释到50ml 。 2 、 PH 对酶活性的影响 取4 个标有号码的20ml 试管。用吸管按下表添加0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和 0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0 的4 种缓冲液。 试管编号 试剂 1 2 3 4 0.2mol/L 磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.72 0.1mol/L 柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28 PH 5 5.8 6.8 8 从4 个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4 支带有号码的试管中，随后于每个试管 中添加0.5%淀粉溶液2ml 和稀释唾液2ml 。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为 1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37 摄氏度恒温水浴中保温。 第四管加入唾液2min 后，每隔1min 由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1 滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加 1 或2 滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH 对唾液淀粉酶活性的影响。 注意事项： 1、从第三管中取混合液，是因为它的PH 接近唾液淀粉酶的最适PH 。 2 、间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各 试管反应时间相同。 四、实验结果 1、温度 1 2 3 一半暗 一半浅 浅蓝 褐 蓝 深蓝 2 、PH 1 2 3 4 深蓝 浅蓝 浅紫 深紫 分析： 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适 温度为37 摄氏度。低温抑制酶的活性，高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由 低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。 PH 也能影响酶的活性，在最适PH 下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性， 唾