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唾液淀粉酶的性质和活力测定
一．实验目的
（一）1 通过唾液淀粉酶性质的测定，了解酶的专一性和多种因
素对酶粗反应的影响， pH ，底物浓度，温度，激活剂，抑制剂等
2 学习酶活力， 酶活力单位， 比活力的测定， 加深对概念的理解；
3 学会用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量，学会用 3,5-二硝基水
杨酸测定还原糖的含量，熟练操作分光光度计。
二．实验试剂和器材
器材：可见光分光光度计，试管，移液管，恒温水浴锅， pH 试
纸， 1000ml 容量瓶和 100ml 的容量瓶各一只；
药品：可溶性淀粉，考马斯亮蓝试剂 G-250，3,5-二硝基水杨酸，
NaoH,HCL ，标准牛血清白蛋白溶液，醋酸，醋酸钠，蒸馏水， 95%
乙醇， 85%磷,；0.15molNaCL/ml ，0.15mol/L 硫酸铜溶液 ，碘化钾–
碘溶液：将碘化钾 20 克和碘 10 克溶解在 100ml 水中，使用前稀释
10 倍。
注： （1）考马斯亮蓝 G-250 试剂：考马斯亮蓝试剂 G-250100mg
溶于 95%乙醇中，加入 100ml85%磷酸，加水稀释至 1000ml，过滤即
可。
（2）标准牛血清白蛋白溶液：结晶牛血清白蛋白用凯式定氮法
测蛋白含量，根据其纯度用 0.15mol/L Nacl 配置成 0.1mg/L 的蛋白液；
（3）配置 0.01%g/ml,0.1%g/ml,，0.5%g/ml,1%g/ml,2%g/ml,3%g/ml
的的溶性淀粉溶液 ;
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(4)配置一系列 pH2 的缓冲溶液
0.2Mol/L 磷酸氢二钠溶液为 28.40g/L,Mr=141.98,称取 2.84g 溶于 100ml 的水
中
0.1Mol/L 柠檬酸溶液 21.01g/l,Mr=210.14,称取 2.1 溶于 100ml 水中；
锥形瓶 0.2Mol/L 磷酸氢二钠 0.1Mol/L 柠檬酸 缓冲液 pH
号 （毫升） （毫升）
1 0.4 19.60 2.2
2 4.11 15.89 3.0
3 7.71 12.29 4.0
4 10.30 9.70 5.0
5 11.15 8.85 5.4
6 12.09 7.91 5.8
7 13.22 6.78 6.2
8 14.55 5.45 6.6
9 16.47 3.53 7.0
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