中性粒细 胞明胶酶相关脂质运载蛋(NGAL).docVIP

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 一、临床适应症背景情况 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neuｔrophｉl　gelaｔiｎase—asｓociated lｉpｏcaｌin,ＮＧAL)又称人脂质运载蛋白2(lipocａｌin2,Lｎ2)或噬铁蛋白(ｓiderocalｉn),就是人脂质运载蛋白家族中得一个新成员、近年来,NGＡL作为一种新得肾损伤标志物倍受关注。早期急性肾损伤、慢性肾病、心肾综合症等疾病血清与尿液中NGAL会显著升高,且其水平监测对病情轻重、疗效及预后判断具有较好得诊断价值。临床检测ＮGAＬ主要有免疫层析法、免疫比浊法、速率色散比浊法、乳胶增强免疫比浊法等。胶乳增强免疫比浊法就是近年来出现得一种较为稳定、准确得体液蛋白均相免疫比浊检测方法。 肾脏损伤约占所有泌尿生殖道损伤得6５％左右。急性　HYＰERＬINＫ　＂　\t　_bｌａnk”　肾损伤就是一组临床综合征,　就是指突发(1—7d内)与持续(2４ｈ)得肾功能突然下降,定义为血清肌酐至少上升0。5mg/dl　1,表现为氮质血症、水电解质与酸碱平衡以及全身各系统症状,可伴有少尿(４00ml/２4h或１7ml/ｈ)或无尿(１0０ｍl/２4h)。肾病得发病迁延难愈,时间超过三个月,病人尿液与相关得血液指标出现异常, HYPERLＩNK ” \t ”＿blanｋ＂ 肾脏病理学、影像学发现异常,或肾脏得肾小球有效滤过率低于６0%,都可统称为“慢性肾病。慢性肾病如未能及时有效救治,导致病情恶化进展,则随病程迁延,慢性肾病患者将发展成为慢性 HＹPＥRLIＮK ＂＂ \t　＂_blaｎk” 肾功能不全、 HＹＰERLINK ” \ｔ ”_blaｎｋ” 肾衰竭,最终形成 HYPEＲLINK ” \ｔ　”_blank”　尿毒症。心肾综合征(cardｉo-reｎａlsｙnｄｒoｍｅ,CRS)即心脏或肾脏对另一器官得损害不能代偿时,互为因果,形成恶性循环,最终加速心脏与肾脏功能得共同损害与衰竭。其发病率、死亡率高,给社会与患者带来沉重得负担、目前对心肾综合征得认识有限,缺乏有效得治疗措施,就是临床处理得难题、 早期诊断急性肾功能损伤时血、尿ＮGAL浓度通常会迅速升高,2h最为明显(?比临界值升十至几百倍),血清肌酐、尿酶等传统指标往往要在24～72ｈ才后明显升高,因而NGAL可用于急性肾功能损伤得早期诊断、监测病情进展NＧAL还可以反映肾功能损伤得严重程度、评估预NＧAＬ可作为急性肾功能损伤得预后指标之一。研究发现,慢性肾病患者得血清、尿NGAL水平显著高于正常人群,并与肾小球滤过率呈密切负相关,而血清肌酐与肾小球滤过率得关联程度不及ＮGAL、因此,慢性肾病患者NGAL水平不仅就是优于血清肌酐反映肾小球滤过率下降得指标,更就是评价慢性肾病患者肾脏损伤程度得标志物。心肾综合征就是一种心脏与肾脏得病理生理紊乱,即由一个器官得功能不全导致得另一个器官得功能不全,死亡率高,共分为5 个类型。研究发现血NGAL诊断1型心肾综合征时,敏感性与特异性分别为1０0%、８6。7%。因此,作为肾损伤得早期诊断指标,密切监测NGＡＬ水平,有利于临床医生正确评价心肾综合征中得肾功能损伤程度,并及时采取干预治疗,减少并发症得发生。 3.相关得临床或试验室诊断方法 目前临床检测NGAL主要有免疫层析法、免疫比浊法、速率色散比浊法、乳胶增强免疫比浊法等。 乳胶增强免疫比浊法具有操作简单,可在几分钟内快速、准确地检测血清蛋白含量,真实反映病情进展与评估治疗效果,对于疾病得早期诊断与治疗具有重要得临床意义;不易受人为操作与外界因素干扰,检测稳定性与重复性都很好;能利用普通得生化分析仪进行检测,容易实现自动化,可在各级基层医疗机构普及与应用等优点。 二、描述 1、技术原理 采用兔抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体致敏得胶乳颗粒,与待测样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在液相中相遇,立即形成不溶性抗原—抗体复合物,并产生一定浊度。浊度高低反映样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白浓度得高低,通过与同样处理得校准品比较,即可计算出样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量。 ２。主要原材料来源及制备方法 原料名称 规格／纯度 性状 三羟甲基氨基甲烷(Ｔriｓ) AR 白色结晶颗粒 兔抗人NGAL抗体致敏胶乳 / 乳白色悬浊液 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) / 无色或淡黄色液体 2.主要生产工艺过程 定容★溶解★原材料质检混合中试称量★ 定容★ 溶解★ 原材料质检 混合 中试 称量★ 封口分装★入库贴签成品质检总装 封口 分装★ 入库 贴签 成品质检 总装 外包材混合标签试剂瓶 外包材 混合标签 试剂瓶 图一 试剂工艺流程图 备注:１.“　★”表示关键工序,配制(称量、溶解、定容)与分装为关键