维生素A和维生素E的测定方法(HPLC )
杨月欣教授等 高效液相色谱法
最小检出量分别为 VA : 0.8ng; aE : 91.8ng; yE: 36.6ng; 8-E : 20.6ng。
原理
食物中的维生素 A及维生素E经皂化提取以后,将其不可皂化的部分提取到有机溶剂中。 用HPLC法
测定维生素A及维生素E的含量。
适用范围
GB12388-90本法适用于各种食物和饲料的测定
3.仪器
(1)
高压液相色谱仪(带紫外检测器)
(2)
六孔恒温水浴锅
(3)
旋转蒸发器
(4)
高纯氮气
(5)
高速离心机
4.试剂
本实验所用试剂皆为分析纯,所用水皆为蒸馏水
4.1无水乙醇:重蒸,不含有醛类物质
检查方法:取2ml银氨溶液于试管中,加入少量乙醇,摇匀,再加入 10%氢氧化钠溶液,加热,放置
冷却后,若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
脱醛方法:取2g硝酸银溶于少量水中。 取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。 将两者倾入1L乙醇中,振摇后,
放置暗处两天(不时摇动,促进反应),经过滤,置蒸馏瓶蒸馏,弃去初蒸岀的 50ml。当乙醇中:
10%抗坏血酸溶液(Vc) W/V临用前配制
50%氢氧化钾溶液(KOH) W/V
4.4无水乙醚 重蒸,不含过氧化物
4.4.1过氧化物检查方法:用 5ml乙醚加1ml10%碘化钾溶液,振摇1min,如有过氧化物则放出游离碘,水 层呈黄色或加4滴0.5%
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