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Analyst 软件应用培训教程 Analyst 软件应用培训教程 关于本教程的说明： 本教程为 AB Sciex 公司为在中国使用的客户培训的辅助材料。 本教程仅提供给经过 AB Sciex 公司培训合格的操作人员使用。 本教程内容仅限于 Analyst 软件基本操作和应用部分。 本教程提供的分析方法仅对用户起参考作用。 本教程解释权在 AB Sciex 公司。 1 Analyst 软件应用培训教程 目录 1、定量分析简明流程 2、成功定量分析应注意的问题 3、定性分析原则与方法 4、LC-MS 实验经验与仪器维护常识 5、Analyst 软件操作简介： Calculator 功能与使用 Library 功能与使用 部分 Script 功能与使用 其他 6、Analyst 软件 QTRAP 功能基本操作简介： QTRAP 扫描速度的校正 QTRAP 系统的扫描方式 QTRAP 系统 IDA 指南 7、部分化合物液质分析参考方法和信息 8、压力单位转换表 2 Analyst 软件应用培训教程 LC-MS/MS 定量分析简明教程 首先确认仪器已经校准，气体、电压工作正常 一．溶液配制 分别将待分析化合物的标准物质配制成 1～10 ppm (1～10ug/ml) 的溶液，用于注射泵连续进样，以优化质谱参数。 二． Q1 Scan ，确定母离子 a．选择或建立 Project 建立一个新项目 (Project)： 点击 Tools→ Project → Creat Project ，出现下图对话框，键入项目名称，点击 “Add All ”添加项目功能，点击 OK，完成。 3 Analyst 软件应用培训教程 硬件配制：激活 MS 主机，如果是 API2000、 3200，硬件配置文件中的质谱主机中应选择 Integrated Syringe Pump 。 进入 MS 的 Manual Tuning 界面，并设置注射泵流速 5～ 10ul/min 。 d．选择质谱扫描方式： Q1 Scan，设置扫描范围 (应包含待分析的化合物 )；根据化合物性质，选择扫描极性 e．手动调节 DP、GS1 等参数，使喷雾平稳、待分析化合物信号灵敏度较高 f． MCA on ，点击 Acquire，采集并存储 20～ 50 张加和图谱 (根据灵敏度 )，并保存方法，例如： Q1.dam 4 Analyst 软件应用培训教程 g．在质谱图区域，点击右键－ “Open File”打开图谱，局部放大，确定母离子的质荷比，准确到 0.1amu 。，如下图，母离子 m/z 应为 609.3。 三． Product Ion Scan ，确定子离子 以第一步测得值为母离子，做 Product Ion Scan（MS2），手动调节 CE 等参数， 使母、子离子都具有一定强度， 一般以母离子的强度占图谱中基峰强度的 1/3 到1/4 为 宜。 5 Analyst 软件应用培训教程 MCA on ，点击 Acquire ，采集并存储 20～ 50 张加和图谱，并保存方法，例如： 609-MS2.dam。 在质谱图区域， 点击右键 “Open File”打开图谱， 选择 2 个最高的子离子， 如上图中，选择 195、397，局部放大，确定子离子的质荷比，准确到 0.1amu， 则上面两个子离子为 195.2、397.3。 6 Analyst 软件应用培训教程 四． MRM ，优化质谱中与化合物相关的参数 以前两步选定的母离子、子离子，组成离子对，例如 609.3/195.2，609.3/397.3 等，做 MRM Scan ，每个离子对的分析时间 100 或200ms。 通过 Edit Ramp ，分别优化 Compound 项下的各参数，如 DP、EP、CE、CXP 等： 点击 Edit Ramp ，选择要优化的参数→点击 OK，出现该参数的优化窗口，可以根据需要改变该参数的优化范围 (Start 、Stop) 和优化步长 (Step) 。不同参数需逐一优化。 然后保存方法，例如 609-MRM.dam 。 同样步骤，优化需要分析的另外化合物，分别保存方法。 五、将 MRM 方法转化为液质联用方法 关掉所有质谱分析界面，将现有质谱体系灭活，激活液相色谱、质谱设备。 单击 Acquire 中 Build Acquire Method ，打开上面保存过的 MRM 方法，右键显示方法左边导引条中第一行 Acquire Method ，点击 Add/Remove Device Method 添加设备：色谱泵、自动进样器 选中方法左边导引条中第一行 Acquire Method 参数页，设置色谱 同步。 7 Analyst 软件应用培训教程 设置色谱参数，分析时间一般为