柿叶总黄酮提取工艺的研究.docxVIP

柿叶总黄酮提取工艺的研究 【摘要】 目的对柿叶中总黄酮的提 取工艺进行优选。方法采用正交实验法，以 总黄酮含量为指标，对乙醇浓度、溶剂量及 提取次数和时间3 种因素进行了研究。结 果将柿叶最粗粉用2 5 倍8 0 %乙醇提取 4次，可以获得较高的提取率。结论此工 艺有效成分提取率较高，重现性好，稳定可 行。 【关键词】 柿叶总黄酮正交实验提取 工艺 Abstract:Objective To o p t i m ize the extraction p rocess of total flav ones in Persimmon L e a v e s , Methods T he concert tration and volume o f alcohol, extractio n time and f requency were systematically studied by the conte nt of total flavones a s the marker . Results T h e more effective way to extract total f 1 a vones was extractio n with 25 times amou nt of 80% alcohol un d e r reflux for 4 tim e s . Conclusion This method obtains more effect ive component s .It i s stable and reliabl e . Key words: Persimmon 1 e aves; Total flavones; Orthogonal test; Ext raction process 柿树是我国的重要 树种之一，柿叶为 柿树科落叶乔木植物柿 Diospyros kaki L. f .的新鲜或干燥叶片。国内外研究表 明，柿叶制剂、柿叶茶及柿叶提取物具有降 压、利尿、抑菌、止血、降脂、抑制癌瘤生 长等多方面的生理活性。 研究表明，柿叶 中的主要有效成分为黄酮类， 大多以昔的形 式存在［1］,其具有抗急性脑缺血损伤神 经保护作用，对心血管系统有增加冠脉流量、 降低血压、降低心肌耗氧量、改善全身血液 循环作用，能增加小鼠对窒息性缺氧的耐力， 并对大鼠急性心肌缺血有一定的保护作用。 此外，柿叶黄酮还有抗氧化清除自由基、抗 过敏、保肝:2］、抗炎、抗菌、抗肿瘤等功 能，在防治中老年人脑动脉硬化、预防脑血 栓形成、防治老年人痴呆和其它神经退行性 疾病、皮肤抗衰老、美容等方面有广泛的开 发前景［3］。为了有效利用柿叶所含的黄酮 类物质，本实验以总黄酮含量为指标，采用 正交实验优选了总黄酮最佳提取条件。 1仪器与试药 1. 1仪器UV -2201 紫外可 见分光光度计；倾斜式高速万能粉碎机；P B 2 0 3 -N 电子精密天平；A J 1 5 0 L电子精密天平。 1 . 2试药实验用药材采自北京市昌 平区，落叶晾干，经鉴定为柿树科柿属柿 Diospyros Kaki L . f .;芦丁对照品；A 1 C 1 3 ? 6 H 2 O等均为分析纯。 2方法与结果 2. 1因素水平表乙醇作为提取溶剂， 对乙醇浓度、溶剂量及提取次数和时间3 种因素进行考察，每种因素分为3 个水平， 结果见表1。 供试品溶液的制备精密称取柿叶最粗 粉1 g共9份，按照表2 L9正交实 验设计方案，用对应浓度和体积的乙醇回流 提取相应次数和时间。回流结束后合并提取 液，放冷，抽滤，滤液转移至10 0 m 1或 200 ml量瓶中，分别以其相应的提取 溶剂定容，过微孔滤膜，作为供试品溶液。 表1正交设计因素水平 表2 L9正交实验设计及结果分析 对照品溶液的制备精密称取1 2 0 C 干燥至恒重的芦丁对照品0 . 0 8 2 5g 于1 0 0 ml量瓶中，7 0 %乙醇超声溶 解，定容至刻度，得芦丁标准液0 . 8 2 5 m g - m 1 — 1 。 显色试剂及测定波长的选择A 1 3 一 NaN02 -Na OH显色法[4] :精 密吸取芦丁标准液0 . 5 m 1和供试液1 #、4 #、7 #各适量至2 5 m 1量瓶中， 分别加入5%NaNO2 1.0 m 1 ,放 置6 min,然后加入1 0 % A 1 3 1 . 0 ml,混匀，放置6 min,再加入4. 3 % NaOHlO ml,用70 %乙醇定容至 刻度，放置15 min。在190 ?70 0 n m范围内扫描测定吸收光谱。 A 1 C 1 3 显色法:5 ::精密吸取 芦丁标准液0. 1 ml和供试液1#、4 #、7 #各适量至1 0 m 1量瓶中，分别 加入 0.