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本试剂仅供研究使用 大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa 试剂盒使用说明书 试剂盒组成:48孔配置/96孔配置 说明书:1份 封板膜:2片(48) /2片(96) 密封袋:1个 目的:【大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa试剂盒说明书】本试剂盒用丁测定 大鼠血活,血浆及相关液体样本中组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)的含量。 服务承诺: 供货期:款到发货。 工作时间内免费的技术咨询和指导 。请来电咨询 为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性 (免费代测)。 试剂盒性能: 样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为0.95以上。 批内与批见应分别小于 9%和11% 保存条件及有效期: 试剂盒保存:2-8 C。 2 .有效期:6个月 检测范围: 0.2IU/L - 6IU/L 试剂盒组成: 酶标包被板 1X 48 1X 96 2-8 C保存 标准品:2700ng/L 0.5ml X 1 瓶 0.5ml X 1 瓶 2-8 C保存 标准品稀释液 1.5ml X 1 瓶 1.5ml X 1 瓶 2-8 C保存 酶标试剂 3 ml x 1 瓶 6 ml X 1 瓶 2-8 C保存 样品稀释液 3 ml x 1 瓶 6 ml X 1 瓶 2-8 C保存 显色剂A液 3 ml x 1 瓶 6 ml x 1 瓶 2-8 C保存 显色剂B液 3 ml x 1 瓶 6 ml x 1 瓶 2-8 C保存 终止液 3ml x 1 瓶 6ml x 1 瓶 2-8 C保存 浓缩洗涤液 (20ml X 20 倍)X 1 瓶 (20ml x 30 倍)x 1 瓶 2-8 C保存 实验原理: 【大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa试剂盒说明书】本试剂盒应用双抗体 夹心法测定标本中大鼠组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)水平。用纯化的大鼠组织型纤溶酶原激 活剂(t-PA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织型纤溶酶原 激活剂(t-PA),再与HRP标记的组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标 抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并 在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)呈正 相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠组织 型纤溶酶原激活剂(t-PA)浓度。 样本处理及要求: 血清:室温血液自然凝固 10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离七、。 尿液:用无菌管收集,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分 钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS, PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持 2-8C的温度。加入一定量的 PBS (PH7.4),用手工或匀浆器 将标本匀浆充分。离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待 检测,其余冷冻备用。 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于 -20C保存,但应避免反复冻融 . 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10孔,在第一、第二孔中分别加标 准品100出,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50 4,混匀;然后从第一孔、第二 孔中各取100 U分别加到第三孔和第四孔, 再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50此 混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50祉弃掉,再各取50 pl分别加到第五、第六孔 中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各 取50 pl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50山混 匀后从第七、第八孔中分别取 50 pl加到第九

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