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本试剂仅供研究使用
大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa 试剂盒使用说明书
试剂盒组成:48孔配置/96孔配置
说明书:1份
封板膜:2片(48) /2片(96)
密封袋:1个
目的:【大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa试剂盒说明书】本试剂盒用丁测定
大鼠血活,血浆及相关液体样本中组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)的含量。
服务承诺:
供货期:款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导 。请来电咨询
为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性 (免费代测)。
试剂盒性能:
样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为0.95以上。
批内与批见应分别小于 9%和11%
保存条件及有效期:
试剂盒保存:2-8 C。
2 .有效期:6个月
检测范围:
0.2IU/L - 6IU/L
试剂盒组成:
酶标包被板
1X 48
1X 96
2-8 C保存
标准品:2700ng/L
0.5ml X 1 瓶
0.5ml X 1 瓶
2-8 C保存
标准品稀释液
1.5ml X 1 瓶
1.5ml X 1 瓶
2-8 C保存
酶标试剂
3 ml x 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
样品稀释液
3 ml x 1 瓶
6 ml X 1 瓶
2-8 C保存
显色剂A液
3 ml x 1 瓶
6 ml x 1 瓶
2-8 C保存
显色剂B液
3 ml x 1 瓶
6 ml x 1 瓶
2-8 C保存
终止液
3ml x 1 瓶
6ml x 1 瓶
2-8 C保存
浓缩洗涤液
(20ml X 20 倍)X 1 瓶
(20ml x 30 倍)x 1 瓶
2-8 C保存
实验原理:
【大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa试剂盒说明书】本试剂盒应用双抗体
夹心法测定标本中大鼠组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)水平。用纯化的大鼠组织型纤溶酶原激
活剂(t-PA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织型纤溶酶原
激活剂(t-PA),再与HRP标记的组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标
抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并
在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织型纤溶酶原激活剂 (t-PA)呈正
相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠组织 型纤溶酶原激活剂(t-PA)浓度。 样本处理及要求:
血清:室温血液自然凝固 10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
血浆:应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离七、。
尿液:用无菌管收集,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20分钟左右(2000-3000转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分 钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS, PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8C的温度。加入一定量的 PBS (PH7.4),用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待 检测,其余冷冻备用。
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于 -20C保存,但应避免反复冻融 .
不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100出,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50 4,混匀;然后从第一孔、第二
孔中各取100 U分别加到第三孔和第四孔, 再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50此
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50祉弃掉,再各取50 pl分别加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各
取50 pl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50山混
匀后从第七、第八孔中分别取 50 pl加到第九
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