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尾叶香茶菜化学及生物活性成分研究 【摘要】：唇形科香茶菜属植物全世界 150 种,我国产 111 种。尾 叶香茶菜 Isodonexcisa(maxim.)hara,分布于我国东北、日本、朝鲜以及 俄罗斯的远东地区。尾叶香茶菜的全草都可入药,具有清热解毒、健 胃活血的功效。尾叶香茶菜的主要化学成分为贝壳杉烯型二萜类化合 物。自 1981 年以来, 已从中分离出 11 种贝壳杉烯型二萜类化合物。 药理研究表明,尾叶香茶菜中的二萜类成分对人体鼻咽癌细胞(KB)、 人体宫颈癌(Hela)细胞有明显的抑制作用,对体内移植性肿瘤艾氏腹 水癌(ECA)、肉瘤-180(S—180)、小鼠白血病(P388)均有显著的生长抑 制作用。为了进一步研究尾叶香茶菜的化学成分和生物活性,本论文 对辽宁省五个产地的尾叶香茶菜的化学成分进行了提取、分离及结构 鉴定,并通过体内、体外试验研究了其药理活性。本论文共分六章。 第一章简要综述了唇形科香茶菜属植物、尾叶香茶菜的化学成分和药 理学研究以及化学分析技术在中草药研究中的应用。自 1954 年日本 学者发现延命草的提取物及其主要成分延命素的抗菌活性以来,随着 从该属植物中大量发现对映— 贝壳杉烯类化合物,发现了除抗肿瘤作 用、抗菌抗病毒作用、抗氧化作用及其他系列活性,如细胞毒、抑制 线粒体的氧化磷酸化作用、昆虫拒食活性、植物生长调节剂活性、抗 炎及心血管系统方面的活性;临床应用主要为民间使用,作为健胃药、 驱虫药;用于治疗跌打损伤、蛇咬伤、疮毒及消炎退热; 内服治疗肠炎、 痢疾、疟疾、黄胆型肝炎、咽喉肿痛、扁桃体炎等,外敷治疗红肿疮 毒;特别是河南等省产的冬凌草除用于抗菌消炎外,还广泛用于食道癌、 贲门癌等癌症的治疗。该属植物资源随着人们对其生物活性的不断深 入认识,相关的研究已有了很大进展,主要集中在化学成分的分离、结 构鉴定等研究方面,但对其药理活性的相关研究较少。第二章从尾叶 香茶菜地上部分中提取挥发油以及其他化学成分,并采用小鼠扭体法 和二甲苯致小鼠耳肿胀法对挥发油镇痛、抗炎等药理作用进行研究。 采用水蒸汽蒸馏法对不同生长期尾叶香茶菜挥发油进行提取;采用气 相色谱-质谱联用(GC—MS)法对挥发油化学成分进行鉴定,通过 Xcalibur 质谱工作站,对得到的各化合物质谱图通过 NIST02 版质谱数 据库图库进行对照鉴定,再结合相关文献分析,确定出所提取的尾叶香 茶菜挥发油的化学成分。按照峰面积归一化法计算出各个化学成分的 百分含量,结果从尾叶香茶菜挥发油中分离出 68 个峰,鉴定出 27 个化 合物,鉴定出的化合物占挥发油总量的 43.30%,主要以含氧衍生物为 主,也含有少量的直链烷、烯和炔烃。药理学实验结果(一)经 t 检验,与 空 白 组 比 较 ,阿 司 匹 林 组 ,挥 发 油 组 剂 量 为 0.028mL·kg~(-1),0.055mL·kg~(-1)和 0.100mL·kg~(-1)组均有非常显著 意义,抑制率分别为 35.31%、40.83%和 52.66%,挥发油药理作用随剂 量的增大而增强;(二)经过 t 检验,与空白组,氢化可的松组,挥发油剂量 为 0.028mL·kg~(-1)和 0.055mL·kg~(-1)组对二甲苯致小鼠耳肿胀有明 显的抑制作用,抑制率分别为 44.36%和 26.72%;这表明尾叶香茶菜挥 发油具有显著的抗炎和镇痛作用。另以尾叶香茶菜地上部分为原料, 通过溶剂提取及薄层层析(TLC)、反复硅胶柱层析和高效液相色谱 (HPLC)分离,得到化合物Ⅰ～Ⅴ,用红外(IR)、质谱(MS)和核磁(NMR) 分析仪器鉴定出从尾叶香茶菜中分得的 3 个贝壳杉烯型二萜类化合 物,分别为化合物 1(Ursolicacid)、化合物 2(Kamebanin) 、化合物 3(Kamebakaurin) 。第三章利用电感耦合等离子体质谱(ICP—MS)对尾 叶香茶菜中无机微量元素进行了测定,通过 ICP—MS 法测得尾叶香茶 菜中 9 种微量元素的含量,结果显示尾叶香茶菜中各种有益微量元素 分别是 Al 、K 、Ca、Mg 、V 、~(56)Fe 、~(57)Fe 、Zn,其含量分别为 0.318、0.264、0.129、0.072、0.025、0.0102、0.0187、0.0744(μg·g~(-1)) 等(本溪产);利用化学方法对尾叶香茶菜的多糖进行了提取并采用小 鼠耳肿胀法和醋酸致小鼠腹膜炎法进行有关的药理学研究,同时与尾 叶香茶菜总二萜、水煎液和醇提液的药理作用进行了对比。结果发现 尾叶香茶菜水煎液,尾叶香茶菜醇提液、