生物化学实验课件：3, 5 - 二硝基水杨酸(DNS)法测定总糖和还原糖.pptVIP

实验一 3, 5 - 二硝基水杨酸(DNS)法 测定总糖和还原糖 掌握还原糖和总糖测定的基本原理 掌握比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。 实验目的 还原糖包括哪些糖？测试还原糖的方法有哪些？ 总糖包括哪些化合物？如何测定？ 3,5－二硝基水杨酸(DNS)法的基本原理是什么？优点？ 3,5－二硝基水杨酸(DNS)法测定时为什么要设计空白管？ 思考题 实验原理 还原糖与非还原糖 还原性糖（Reducing sugar） —— 与斐林、土伦、本氏试剂呈正反应的糖 非还原性糖（Nonreducing sugar） ——无变旋、还原、成脎性质 在NaOH和丙三醇存在下，3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。 本方法操作简便，快速，杂质干扰较少。 试管和试管架 碱滴定管（50ml） 铁架台 滴定管夹 吸量管（1ml和2ml） 容量瓶（100ml） 水浴锅 玻璃漏斗和烧杯。 三脚架 量筒 白瓷板 玻璃棒