2020基因工程的原理和技术.pptVIP

同一种限制酶切割 质粒 外源基因 重组 DNA 分子 （重组质粒） DNA 连接酶 问题 2 ： 形成的重组质粒导入受体细胞后，除了能 够稳定存在外，并且可以遗传给下一代。同时，使 目的基因在受体细胞中表达和发挥作用，需要对重 组质粒作怎样的修饰？ ? 据图回答： 一个表达载体的组成，除了目的基 因外，还必须有哪些基本元件？ ( 二 ) 形成重组 DNA 分子（构建基因 表达载体 ) 基因表 达载体 的组成 启动子 目的基因 终止子 复制起点 标记基因 一 . 基因工程的基本操作步骤 （技术） ( 一 ) 获得目的基因 通常用 同一种 限制酶切割目的基因和载体 ( 质粒 ) ，形成相同的 粘性末端，再用 DNA 连接酶将二者连接 , 形成重组 DNA 分子 （基因表达载体）。 ? 用BamHⅠ对胰岛素基因和质粒切割，加入 DNA 连接酶，得到的都是重组质粒吗？ 含目的基因的 DNA 片段 载体 BamH Ⅰ BamH Ⅰ DNA 连接酶 重组体 载体自连 目的基因 自连 双酶切连接： 思考： 如何 避免质粒和目的基因的自身环化？ 1 、避免载体和目的基因的自身环化、载体和目的基因间反向连接 2 、提高重组 DNA 分子的重组率 ( 三 ) 将目的基因导入受体细胞 ( 二 ) 形成重组 DNA 分子（构建基因表达载体 ) 一 . 基因工程的基本操作步骤 （技术） ( 一 ) 获得目的