临床检验基础 红细胞检验技术 03 红细胞计数、血红蛋白测定.ppt

血红蛋白测定 血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，单位用g/L表示。 一、定义 血红蛋白概述(hemoglobin concentration determination) 组成： FEP Fe++ 亚铁血红素 珠蛋白 Hb 血红蛋白测定 血红蛋白概述(hemoglobin concentration determination) 类型： HbA （α2β2）＞ 90% HbA2 （α2δ2）2～ 3 ％ HbF （α2γ2）≤ 1％ 新生儿HbF占70%，称胎儿血红蛋白。 血红蛋白测定 血红蛋白的结构 血红素 珠蛋白肽链 珠蛋白+亚铁血红素 血红蛋白测定 功能: 血红蛋白 (血色素， Hb 或 HGB) 是一种微红色的胶体物质，分子量为 64 458。是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34 毫升。成人红细胞总量约有 600 g 血红蛋白，可携氧 800 毫升。 血红蛋白测定 测定方法 优点 缺点 HCN测定法 WHO和ICSH推荐的参考方法，操作简便、快速，结果稳定、可靠，试剂易于保存，便于质粒 1、KCN有剧毒；2、高白细胞和高球蛋白可致混浊；3、HbCO转化慢 AHD575法 试剂简易，无毒性，呈色稳定，准确性与精密度较高 不便于自动检测，HbF不能转化 表1-4-3 血红蛋白测定方法学评价 血红蛋白测定 测定方法 优点 缺点 SDS-Hb测定法 试剂无毒、无公害、操作简便，呈色稳定，准确度和精密度高，次选方法 1、SDS-Hb消光系数未确定； 2、SDS本身质量差异性较大； 3、SDS破坏白细胞，不适于同时进行WBC计数的自动化分析 表1-4-3 血红蛋白测定方法学评价 血红蛋白测定 % 检测原理 氰化高铁血红蛋白 (HiCN) 测定法 除了硫化血红蛋白外各种血红蛋白 高铁氰化钾氧化 高铁血红蛋白 CN-结合 稳定的棕红色复合物氰化高铁血红蛋白。 540 nm 处有一吸收波峰，用分光光度计测定。 换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。 血红蛋白测定 % 20ul血＋5ml血红蛋白转化液→混匀→室温下放置5min→540nm波长调零测吸光度。 计算 公式：Hb(g/L)＝A×367.7 校准图： HiCN浓度为横坐标， A实测值为纵坐标。 血红蛋白测定 % ①成年：　男性： 120 — 160 g ／ L ； 　女性： 110 — 150 g ／ L ； ②新生儿： 170 — 200 g ／ L 。 ③婴儿 110 — 120 g ／ L。 ④儿童 120 — 140 g ／ L 。 ⑤老年 (70 岁以上) ：男性： 94 — 122 g ／ L ； 女性： 87 — 112 g ／ L 。 参考值 血红蛋白测定 % 采血部位 不同的采血部位结果不同，静脉血比毛细血管血的结果低 10 ％～ 15 ％。 标本混浊可引起血红蛋白假性升高。(见下表) 各种血红蛋白测定法都以HiCN测定法为标准。 转化液应储存在棕色有塞玻璃瓶中，不能储存于塑料瓶中。 注意事项 血红蛋白测定 % 血红蛋白测定 % 血红蛋白测定 % 氰化钾有毒，试验后废液首先以水稀释(1：1)，再按每升上述稀释废液加35ml的剂量加入次氯酸钠溶液(安替福民)，充分混匀后敞开容器口放置15小时以上，CN—氧化为N2和CO2(挥发)或水解成CO32—和NH4+，而后倾入下水道。 氰化钾的处理： 血红蛋白测定 % 临床意义和红细胞计数相似，但对贫血程度的判断上优于红细胞计数。 衡量贫血程度的指标： 轻 中 重 极重 120--90--60--30 临床意义 血红蛋白测定 % 需注意： 在某些病理情况下，血红蛋白和红细胞的浓度不一定能正确反映全身红细胞总容量的多少。 在某些贫血，RBC和Hb减少不一致，同时测RBC和Hb ，对诊断更有意义。 临床意义 血红蛋白测定 % 血液总容量改变：大量失血早期 全身血浆容量改变： 失水或水潴留 血液浓缩或稀释 影响因素 感谢观看！ Thank！ 红细胞形态检查 异常红细胞 形状改变 可能机制 临床意义 新月形红细胞 新月形，D≈20μm，着色极淡 蒸馏水实验；RBC内渗透压高，水分吸入使体积胀大，推片时细胞破裂 某些溶血性贫血，如PNH 角形红细胞 细胞表面有数个粗大的角样大突起，形态不一 RBC受到机械损害 DIC、血管内纤维沉积症、微血管病性贫血、肾小球肾炎、尿毒症和移植后。 续表2-10 红细胞形状异常的机制及临